[发明专利]陆地棉基因组的精确高效编辑方法有效
| 申请号： | 201910290886.0 | 申请日： | 2019-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN110283840B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 金双侠;李波;芮杭萍;李亚军;王琼琼;张献龙 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 张红兵 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及陆地棉基因组的精确高效编辑方法。本发明对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ载体进行改造，以LbCpf1蛋白取代原有的Cas9蛋白，构建在棉花中具有编辑能力的载体GhRBE3。选取GhCLA为目标基因验证GhRBE3在棉花中的应用。设计1个靶标，利用农杆菌介导的遗传转化将Cpf1基因编辑系统导入棉花基因组，对转基因植株进行Sanger测序和高通量测序，检测本发明在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率及脱靶效应。本发明具有良好的编辑效率和特异性。 | ||
| 搜索关键词： | 陆地棉 基因组 精确 高效 编辑 方法 | ||
【主权项】：
1.一种能够精确识别基因组“‑TTTV‑”碱基并能产生黏性末端的编辑陆地棉基因组高效转化载体GhRBE3，其特征在于，该载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
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