[发明专利]一种雪蚤抗冻蛋白SF-P的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201910292940.5 | 申请日： | 2019-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN110055257B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 吴金鸿;吴乔羽;杨丹璐;于颖;顾欣哲;龚盛祥;汪少芸;王正武 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K14/435;C12N15/70;A23L3/3526;C12N1/04;A01N1/02 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种雪蚤抗冻蛋白SF‑P的制备方法及应用。所述抗冻肽是通过合成雪蚤抗冻肽基因，构建原核表达载体后表达纯化得到的。首先将人工合成的SF‑P编码基因插入到PET28a‑sumo载体中，构建所述抗冻肽的表达质粒；将重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞，进行蛋白表达，用亲和层析法对蛋白进行纯化后进行酶切，获得SF‑P抗冻肽。大肠杆菌具有遗传稳定性，可以持续分泌表达外源基因，所获重组工程菌株，可以高量、稳定地分泌表达雪蚤抗冻肽SF‑P，在抗冻蛋白领域发挥了重要的作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 雪蚤抗冻 蛋白 sf 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种重组雪蚤抗冻肽SF‑P的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：将人工合成的抗冻肽编码基因构建于克隆载体上；步骤二：将含有所述抗冻肽表达序列的重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞中，进行蛋白表达；步骤三：用亲和层析法对表达蛋白进行纯化；步骤四：使用蛋白酶切开纯化蛋白标签，获得所述抗冻肽。
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