[发明专利]一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜感光细胞分化的方法及其应用有效
申请号: | 201910310286.6 | 申请日: | 2019-04-17 |
公开(公告)号: | CN110106147B | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 余路阳;张传宇;李金英;袁惟芯;邱晨;郭礼和;邵小燕;刘佳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学;上海赛傲生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0793 | 分类号: | C12N5/0793;A61K35/30;A61P9/10 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 徐飞虎;徐关寿 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜感光细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用。本发明提供了一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜感光细胞分化的方法,在适宜的条件下培养人羊膜上皮细胞,加入诱导组合物后诱导人羊膜上皮细胞向视网膜感光细胞分化,诱导产生的细胞高表达Chx10、Rx、Crx、NRL等视网膜感光细胞的典型基因。收集诱导分化后的细胞进行视网膜下腔注射,通过ERG以及OCT检测发现眼睛电生理信号明显增强,眼底结构明显改善,视网膜厚度明显增加,显示可治疗和/或改善视网膜退行性疾病进展状况,在眼科疾病的临床应用上将具有广泛的前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 羊膜 上皮细胞 视网膜 感光 细胞 分化 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜感光细胞分化的方法,所述方法包括如下的步骤:(1)取人羊膜上皮细胞,在适宜的条件下培养12‑48小时;(2)将细胞培养液换为诱导组合物A继续培养3‑14天,诱导人羊膜上皮细胞向视网膜感光细胞分化,其中所述的诱导组合物A为含有1‑10μM SB‑431542、1‑10μM CKI‑7和5‑50ng/ml human noggin的细胞培养基;(3)将细胞培养液换为诱导组合物B继续培养3‑10天,诱导人羊膜上皮细胞分化为视网膜感光细胞,其中所述的诱导组合物B为含有5‑50ng/ml human noggin、10‑100μM牛磺酸和1‑10μM维A酸的细胞培养基。
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