[发明专利]一种环颈雉卵清丝氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化方法在审
| 申请号： | 201910311006.3 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN109942701A | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 韩曜平;张晶晶;邓歆玥;徐烨;陶翊雯;王静文 | 申请（专利权）人： | 常熟理工学院 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;C07K1/16 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 张俊范 |
| 地址： | 215500 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种环颈雉卵清丝氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化方法，取卵清液两次离心分离冻干后分别采用Sephadex G‑50和Sephadex G‑75凝胶洗脱分离纯化得到环颈雉卵清丝氨酸蛋白酶抑制剂。本发明得到的环颈雉卵清丝氨酸蛋白酶抑制剂采用具有较强的丝氨酸蛋白酶抑制剂活性。 | ||
| 搜索关键词： | 丝氨酸蛋白酶抑制剂 分离纯化 冻干 凝胶 洗脱 | ||
【主权项】：
1.一种环颈雉卵清丝氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化方法，其特征在于，包括步骤：环颈雉卵清洗后去壳收集卵清液，混合磷酸氢盐缓冲溶液，用研钵研磨匀浆第一次离心分离取上清液制成冻干粉，将冻干粉溶解于磷酸氢盐缓冲溶液中第二次离心分离取上清液；用磷酸氢盐缓冲溶液平衡Sephadex G‑50凝胶过滤柱，取第二次离心分离取上清液上样于处理后的Sephadex G‑50凝胶过滤柱，用磷酸氢盐缓冲溶液进行第一次洗脱，使用紫外分光光度计于波长280mm处检测各收集管蛋白含量合并各洗脱峰并冻干；用磷酸氢盐缓冲溶液平衡Sephadex G‑75凝胶过滤柱，将前一步骤获得冻干物溶于磷酸氢盐缓冲溶液进行第三次离心取上清液上样于处理后的Sephadex G‑75凝胶过滤柱，用磷酸氢盐缓冲溶液进行第二次洗脱，使用紫外分光光度计于波长280mm处检测各收集管蛋白含量合并各洗脱峰并冻干得到环颈雉卵清丝氨酸蛋白酶抑制剂，所述磷酸氢盐缓冲溶液浓度为0.1M，pH为6.0。
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