[发明专利]液相色谱串联质谱检测血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度的方法及检测试剂

摘要

本发明公开了一种液相色谱串联质谱检测血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度的方法及检测试剂，所述方法包括以下步骤：（（ⅰ）配制标准溶液；（ⅱ）配制内标溶液；（ⅲ）样本预处理；（ⅳ）标准曲线绘制；（ⅴ）测定血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度。所述检测试剂包括流动相A、流动相B、标准溶液和内标溶液。本发明提供了一种液相色谱串联质谱检测血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度的方法，该方法伊马替尼和内标物卡马西平能完全分离，且受内生物质杂质峰影响小，回收率和精密度高。

主权项

1. 一种液相色谱串联质谱检测血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度的方法，其特征在于：包括以下步骤：（ⅰ）配制标准溶液称取甲磺酸伊马替尼标准品，用甲醇溶解，配制成标准溶液；（ⅱ）配制内标溶液称取卡马西平，用甲醇溶解，配制成内标溶液；（ⅲ）样本预处理用移液器精密吸取卡马西平加入到血浆中，涡旋混匀后，用移液器吸取甲醇，将血浆的蛋白析出，涡旋震荡，充分萃取后，进行离心，离心后用针筒吸取上清液，用滤膜过滤，得到样品，并注入到进样瓶中，待分析；（ⅳ）标准曲线绘制配置不同浓度的标准溶液，每个浓度分别加入到含有血浆的离心管中，涡旋混匀；混匀后加入内标溶液，涡旋混匀，用移液器吸取甲醇，将血浆的蛋白析出，涡旋震荡，充分萃取后，进行离心，离心后用针筒吸取上清液，用滤膜过滤，样品注入到进样瓶中，用液相色谱串联质谱进样分析，以伊马替尼质量浓度为横坐标，伊马替尼与内标物的峰面积比值为纵坐标，绘制标准曲线；所述液相色谱的分析条件为：色谱柱：Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB‑C18(4.6*50mm)2.7‑Micron；流动相：流动相A为体积分数0.2%的甲酸，流动相B为乙腈；流速：0.5ml/min；进样量10ul；检测波长282、272；柱温35℃；液相色谱洗脱条件：在0 min ~1.5 min内流动相A和流动相B的体积比逐渐从70:30均匀下降至10:90；在1.5 min ~4.5 min内流动相A和流动相B的体积比保持在10:90；在4.5 min ~5 min内流动相A和流动相B的体积比逐渐从10:90均匀上升至70:30；在5 min ~8 min内流动相A和流动相B的体积比保持在70:30；所述质谱的分析条件为：离子源：ESI＋；检测模式：多离子反应监测；监测离子对：m/z 494.3→m/z 394.2(1)、m/z237.3→m/z194.1(2)；碎裂电压：100v（1）、135v（2）；碰撞能量：20ev（1）、15ev（2）；干燥气温度：350℃；干燥气流速：8L/min；雾化气压力：30psi；毛细管电压：4kv；（ⅴ）测定血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度根据步骤（ⅳ）中的液相色谱的分析条件和质谱的分析条件，对预处理后的样本进行测定，获得样本血浆中甲磺酸伊马替尼血药浓度。