[发明专利]一种干细胞体外诱导培育心肌细胞的方法有效
| 申请号： | 201910314980.5 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN110157663B | 公开（公告）日： | 2021-07-27 |
| 发明（设计）人： | 陈忠平 | 申请（专利权）人： | 朗姿赛尔生物科技（广州）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 广州一锐专利代理有限公司 44369 | 代理人： | 杨昕昕 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及干细胞领域，提供一种干细胞体外诱导培育心肌细胞的方法，用于解决干细胞向心肌细胞分化时分化率低的问题。本发明提供的一种干细胞体外诱导培育心肌细胞的方法，取自体干细胞制成单细胞悬液，制备拟胚体；将制备好的拟胚体转移到明胶包被的孔板，每孔一个拟胚体添加诱导分化培养基，进行干预分化培养；所述诱导分化培养基中包括丹酚酸B 0.7~1.2mg/L、人参皂苷0.5~1.5mg/mL、淫羊藿苷0.8~1.2mg/L。可以得到足量且可以有效提高细胞移植疗法成功率的心肌细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 干细胞 体外 诱导 培育 心肌 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.一种干细胞体外诱导培育心肌细胞的方法，其特征在于，S11.取自体干细胞制成单细胞悬液；S12.将单细胞悬液细胞计数后用分化培养基将其稀释成细胞浓度为10‑5~10‑3cells/mL的干细胞悬液，接种于细菌培养皿的盖子内表面上，翻转培养皿盖子，使盖子上的干细胞形成悬滴，培养皿中加入水或水溶液以保持悬滴在孵育过程中的湿度，培养皿置于5%CO2、37℃培养箱中培养1~3天；S13.收集培养皿盖子上悬滴中形成的拟胚体，将其转移到盛有分化培养基的细菌培养皿中，放入培养箱中继续悬浮，促使拟胚体进一步增殖；S14.将制备好的拟胚体转移到明胶包被的孔板，每孔一个拟胚体添加诱导分化培养基，进行干预分化培养；所述诱导分化培养基中包括丹酚酸B 0.7~1.2mg/L、人参皂苷0.5~1.5mg/mL、淫羊藿苷0.8~1.2mg/L。
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