[发明专利]基于核酸酶偶联PCR原理富集低丰度DNA突变的检测技术体系及应用有效
| 申请号： | 201910324580.2 | 申请日： | 2019-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN109880891B | 公开（公告）日： | 2021-07-30 |
| 发明（设计）人： | 冯雁;刘倩;荀冠华;郭翔;李忠磊;崇曰盛 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 徐迅;王正君 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种基于核酸酶偶联PCR原理富集低丰度单核苷酸突变型基因的检测体系。具体地，本发明提供了一种提高目标核酸的相对丰度的方法，包括：(a)提供一核酸样本，含有目标核酸和非目标核酸，所述目标核酸在核酸样本中的丰度为F1a；(b)以核酸样本中的核酸为模板，在扩增‑切割反应体系中进行PCR和核酸切割反应，从而获得扩增‑切割反应产物；所述目标核酸在扩增‑切割反应产物中的丰度为F1b，F1b/F1a的比值≥10。本发明具有非侵入性、易操作、快速等优势，灵敏度可以达到0.01％，样本的DNA量可以低至aM级。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 核酸酶 pcr 原理 富集 低丰度 dna 突变 检测 技术 体系 应用 | ||
【主权项】：
1.一种提高目标核酸的相对丰度的方法，其特征在于，包括步骤：(a)提供一核酸样本，所述的核酸样本含有第一核酸和第二核酸，其中，所述的第一核酸为所述目标核酸，而所述的第二核酸为非目标核酸，并且，所述目标核酸在所述的核酸样本中的丰度为F1a；(b)对所述核酸样本中的核酸为模板，在扩增‑切割反应体系中进行聚合酶链反应(PCR)和核酸切割反应，从而获得扩增‑切割反应产物；其中，所述的核酸切割反应用于特异性切割非目标核酸，但不切割所述目的核酸；并且，所述的扩增‑切割反应体系含有(i)进行PCR反应所需的试剂和(ii)进行核酸切割反应所需的试剂；其中，所述目标核酸在所述的扩增‑切割反应产物中的丰度为F1b，其中，F1b/F1a的比值≥10。
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