[发明专利]一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法，采用超声波萃取、冷冻脱脂、第一次分散固相萃取净化、衍生和反萃取、第二次分散固相萃取净化、气相色谱质谱法测定海产品中的有机锡，该方法操作简单，能快速完成样品前处理，其中首次采用两次分散固相萃取进行净化，整个分散固相萃取净化加上衍生和反萃取过程只需要20～30min，结果准确，九种有机锡检出限为0.4～1.0μg/kg，回收率为80～117％，相对标准偏差(n＝5)为3.8～7.5％，具有较高的灵敏度和令人满意的回收率及重现性，能用于海产品中有机锡的含量测定。

主权项

1.一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的采集和制样将海产品样品捣碎匀质后，冷冻干燥，于‑18℃冷藏，待测；(2)取样和超声波萃取称取1.00g待测样品，加入5～10mL含有环庚三烯酚酮的醋酸与甲醇混合溶液，醋酸与甲醇混合溶液中，环庚三烯酚酮质量浓度为0.03％，醋酸与甲醇的体积比为1：9，涡旋后超声提取，得提取液；(3)冷冻脱脂将提取液置于‑85℃冷冻脱脂后，高速离心，取上清液A；(4)第一次分散固相萃取净化在上清液A中加入100～200mg N‑丙基乙二胺固相吸附剂，涡旋后高速离心，取上清液B；(5)衍生和反萃取在上清液B中加入30～40mL浓度为1mol/L、pH为4.5～5的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液、1g氯化钠及5mL正己烷，涡旋混匀，再加入200μL含四乙基硼化钠的四氢呋喃溶液，四氢呋喃溶液中四乙基硼化钠的质量浓度为10％，涡旋振荡后高速离心，取上层正己烷相；(6)第二次分散固相萃取净化在正己烷相中，依次加入200mg无水硫酸钠脱水和50～200mg石墨化碳黑固相吸附剂，涡旋后取上清液，滤膜过滤，取滤液；(7)浓缩定容将滤液在水浴温度35～40℃下，吹氮蒸发至干，用正己烷溶解，并定容至200μL，作为上机溶液。(8)进样针抽取上述上机溶液用进样针抽取上述上机溶液，按设定好的气相色谱‑质谱仪检测条件进行上样检测，得总离子流色谱图，选用离子监测模式，定性和定量离子；气相色谱条件为：进样口温度为260℃；载气为高纯氦气，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样方式为不分流进样，0.75min后以15mL/min吹扫；传输线温度260℃；气相色谱柱升温程序为：初始温度60℃，保持1.0min，以20℃/min升温至220℃，保持10min，再以15℃/min升温至280℃，保持5.0min,总运行时间28min；气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的HP‑35MS毛细管气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质量分数为35％，二甲基聚硅氧烷的质量分数为65％；质谱条件为：电子轰击(EI)离子源，离子源温度230℃，电离能量70eV；溶剂延迟3min；四级杆温度150℃，扫描范围50～450amu，检索谱库NIST；(9)标准曲线绘制选择离子监测模式进行定性：取浓度为1000μg/L的一丁基锡、二丁基锡、三丁基锡、一苯基锡、一辛基锡、四丁基锡、二苯基锡、二辛基锡、三苯基锡的有机锡混合标准使用液100μL，用正己烷分别定容至200μL，得到浓度为500μg/L标准溶液；将标准溶液按照上述步骤(8)的要求进行操作得到标准溶液的总离子流图色谱图，并与单个分析物的总离子流图色谱图进行定性离子、定量离子比较，同时结合保留时间，确定九种有机锡的种类；该九种有机锡的定性离子、定量离子、保留时间用以作为外标法定量时识别九种有机锡色谱峰识别的依据；选择外标法定量：取浓度为100μg/L的有机锡混合标准使用液20、50、200μL，同时另取浓度1000μg/L的有机锡混合标准使用液50、100、200μL，分别加入正己烷定容至200μL，得到六次加标浓度范围均为10～1000μg/L的标准曲线系列溶液；将六种不同加标浓度的标准曲线系列溶液，根据加入的有机锡浓度和相应定量离子积分峰面积的对应关系建立标准曲线；(10)样品测定将步骤(8)中得到的总离子流色谱图中的有机锡的相应定量峰面积，与上述步骤(9)中得到的标准曲线进行比较，最后通过换算即可得到样海产品品中九种有机锡的实际含量。