[发明专利]一种印楝细胞悬浮培养基及细胞悬浮培养方法有效
申请号: | 201910337245.6 | 申请日: | 2019-04-25 |
公开(公告)号: | CN109880789B | 公开(公告)日: | 2022-12-23 |
发明(设计)人: | 杨友霞 | 申请(专利权)人: | 无锡吉成生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04 |
代理公司: | 上海宏京知识产权代理事务所(普通合伙) 31297 | 代理人: | 李倩倩 |
地址: | 214000 江苏省无锡市新吴区菱*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种印楝细胞悬浮培养基及细胞悬浮培养方法。所述印楝细胞悬浮培养基是在基本培养基的基础上优化组分配比,并添加了一定量的钒酸钠、L‑半胱氨酸、酪氨酸、烟酰胺、二硫苏糖醇、β‑D‑半乳糖、环己六醇磷酸酯、胺鲜酯、6‑BA、蜕皮激素、硝普钠、二辛基磺基琥珀酸钠、辣蓼草汁和地黄连汁;所述细胞悬浮培养方法包括以下步骤:1)无菌试管苗的获得,2)愈伤组织诱导与继代培养,3)细胞悬浮培养。应用本发明的培养基及培养方法不仅能获得稳定的印楝细胞悬浮培养体系,还能显著提高悬浮细胞的生物量和印楝素含量,为印楝细胞规模化培养生产印楝素提供了技术支撑,具有重要的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 悬浮 培养基 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种印楝细胞悬浮培养基,其特征在于:该培养基的配方如下:KNO3 2100‑2400mg/L,(NH4)SO4 450‑550mg/L,MgSO4·7H2O 220‑250mg/L,NaH2PO4 237‑255mg/L, CaCl2·2H2O 528‑540mg/L,MnSO4·4H2O 8‑12mg/L,H3BO33.2‑3.6mg/L,ZnSO4·7H2O 3.5‑4.0mg/L,KI 0.52‑0.56mg/L, CuSO4·5H2O 0.02‑0.03mg/L,CoCl2·6H2O 0.02‑0.03mg/L,Na2MoO4·2H2O 0.21‑0.25mg/L,FeSO4·7H2O 22‑25mg/L,Na2‑EDTA 31‑34mg/L,肌醇94‑104mg/L,甘氨酸3‑5mg/L,盐酸硫胺素0.9‑1.3mg/L,盐酸吡哆醇0.5‑0.7mg/L,钒酸钠1.5‑1.7mg/L,L‑半胱氨酸33‑37mg/L,酪氨酸18‑22mg/L,烟酰胺0.5‑0.7mg/L,二硫苏糖醇1.4‑1.8mg/L,β‑D‑半乳糖2.5‑3.0mg/L,环己六醇磷酸酯9.4‑10.0mg/L,胺鲜酯 0.28‑0.32mg/L,6‑BA 0.4‑0.6mg/L, 蜕皮激素 2.4‑3.0mg/L,硝普钠0.1‑0.3mmol/L,二辛基磺基琥珀酸钠0.11‑0.15g/L,辣蓼草汁13‑18mL/L,地黄连汁13‑18mL/L,蔗糖17‑21g/L,葡萄糖 12‑14g/L,pH值为5.4‑5.8。
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