[发明专利]黄参茎叶中木樨草素-7-O-葡萄糖甙的高效液相色谱-串联质谱检测方法

摘要

本发明涉及一种黄参茎叶中木樨草素‑7‑O‑葡萄糖甙的高效液相色谱‑串联质谱检测方法。本发明样品为经超声辅助提取和X‑5型大孔树脂纯化后所得流出液经冷冻干燥后的黄参茎叶多酚纯化物冻干粉，纯度为42.38％；采用250‑4反相C18柱分离，使用A：甲醇：冰乙酸，B：甲醇：冰乙酸：超纯水作为流动相进行梯度洗脱，使用电喷雾离子源负离子，一级质谱MS2scan模式进行全扫检测；二级质谱production模式检测，外标法定量，结果表明：所使用标准品木樨草素‑7‑O‑葡萄糖甙标准溶液在0～50mg/L范围内线性关系良好，相关系数为0.9999，三个添加量水平的回收率分布在95～102％左右，相对标准偏差较低。本发明具有较高灵敏度、精确度和稳定性，适用于黄参茎叶中四种多酚成分的定性和定量检测。

主权项

1.黄参茎叶中木樨草素‑7‑O‑葡萄糖甙的高效液相色谱‑串联质谱检测方法，其特征在于：所述的方法包括以下的步骤：(1)标准样品的制备木樨草素‑7‑O‑葡萄糖甙(L7G)标准液：1mg木樨草素‑7‑O‑葡萄糖甙，甲醇溶解定容至10mL，低温保存备用，使用时，用含有2％甲酸的50％甲醇溶液将其分别稀释配制为0mg/L，5mg/L，10mg/L，20mg/L，40mg/L，50mg/L的标准溶液，置于‑20℃冰箱保存；(2)检测样品的制备将黄参茎叶进行清洗烘干粉碎、过60目筛得到黄参茎叶粉末，再将粉末通过超声辅助法得到黄参茎叶多酚粗提物，经大孔吸附树脂分离纯化，得到黄参茎叶多酚纯化物，黄参茎叶多酚纯化物用色谱级甲醇配置为浓度为1mg/mL的黄参茎叶多酚溶液，过0.45μm水系滤膜，样品放置于‑20℃冰箱保存待测；(3)色谱条件色谱柱：Merk公司，250‑4反相C18柱，250×4.6mm,5μm；流动相组成：A：甲醇：冰乙酸的体积比为99.7:0.3，B：甲醇：冰乙酸：超纯水的体积比为10:0.3:89.7；液相洗脱梯度：洗脱条件为：0～10分钟：A，30％；B，70％；10～60分钟：A，30％～44％；B，70％～56％；进样量：10μL；柱温：30℃；流速：0.4mL；紫外检测波长：280nm；(4)质谱分析条件离子源：电喷雾(ESI)离子源；扫描方式：负离子扫描；一级质谱检测方式：MS2scan模式进行全扫；二级质谱检测方式：production模式；特征离子：447，489m/z；CE(collision energy)碰撞能量：25eV。