[发明专利]一种水体微生物菌种分离与纯化的方法和采样装置有效
| 申请号： | 201910350968.X | 申请日： | 2019-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN110029064B | 公开（公告）日： | 2021-11-23 |
| 发明（设计）人： | 朱超;杨永林;王慧琴;马宏瑞;贾柳;陈喆倩 | 申请（专利权）人： | 陕西科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12M1/26 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 徐文权 |
| 地址： | 710021 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明一种水体微生物菌种分离与纯化的方法和采样装置，包括步骤1，将待分离与纯化的样品和碳酸钙溶液加入海藻酸钠溶液中得到沉淀和悬浊液；步骤2，向失水山梨糖醇脂肪酸酯和液体石蜡组成的油相A中加入悬浊液得到混合体系A；步骤3，向混合体系A中加入6～10ml的冰醋酸，在22～25℃下反应8～12min得到混合体系B，向混合体系B中加入氯化钙溶液，得到微胶囊，用灭菌水清洗微胶囊得到微胶囊菌种库；步骤4，将微胶囊菌种库逐一接种到多孔平板中培养得到单一菌落，其中多孔平板中装有待分离与纯化菌种的BM液体培养基溶液；本发明结合了乳化微球囊法和多孔平板法，可作为环境功能微生物生态种质资源的建库和分离。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 水体 微生物 菌种 分离 纯化 方法 采样 装置 | ||
【主权项】：
1.一种水体微生物菌种分离与纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤，步骤1，将待分离与纯化的样品和碳酸钙溶液加入海藻酸钠溶液中得到沉淀和悬浊液，其中海藻酸钠溶液中海藻酸钠的质量与碳酸钙溶液中碳酸钙的质量比为(2.5～75)：(0.5～2.5)；步骤2，向失水山梨糖醇脂肪酸酯和液体石蜡组成的油相A中加入悬浊液得到混合体系A，其中，在组成油相A时，失水山梨糖醇脂肪酸酯的体积是液体石蜡体积的0.1％～0.3％，在加入悬浊液时，悬浊液的体积与油相的体积比为1：(2～4)；步骤3，向混合体系A中加入6～10ml的冰醋酸，在22～25℃下反应8～12min得到混合体系B，向混合体系B中加入氯化钙溶液，其中每次加入的氯化钙质量为0.004～0.01g，得到3～5mm的微胶囊，用灭菌水清洗3～5mm的微胶囊得到微胶囊菌种库；步骤4，将微胶囊菌种库逐一接种到多孔平板中培养得到单一菌落，其中多孔平板中装有待分离与纯化菌种的BM液体培养基溶液。
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