[发明专利]一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白

摘要

本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白。本发明制备的重组融合蛋白，系采用经过密码子优化、破伤风毒素C片段与诺维梭菌α毒素的C末端以及N端的无毒性抗原表位的重组融合蛋白生产，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免了天然毒素的生物安全隐患。该重组融合蛋白可用来制备破伤风梭菌和诺维梭菌亚单位疫苗，与我国目前商品化的破伤风梭菌和诺维梭菌天然毒素灭活疫苗相比，具有制备工艺简单、免疫剂量低、疫苗效力优良等优点，并大大降低了疫苗生产过程中的生物安全风险，是上述两种梭菌毒素疫苗升级换代的理想候选疫苗抗原；而且在与其它抗原共同制备联苗时，无需增大联苗的使用剂量，即可制备联苗。

主权项

1.一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白，其特征在于所述无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白(rTTc‑Tcnα_nc)与成熟的野生型破伤风毒素相比，只含有无毒的C片段；与成熟的野生型诺维梭菌α毒素相比，只含有无毒性的C端以及N端的无毒性抗原表位，优选的为以下3个抗原表位：第3位～第17位、第965位～第979位和第983～第997位氨基酸；在融合蛋白的C端含有便于蛋白纯化的标签；所述重组融合蛋白是由重组表达rTTc‑Tcnα_nc的宿主细胞大肠杆菌(Escherichia coli)的BL21(DE3)细胞作为生产菌株制备的，该菌株被命名为大肠埃希氏菌BL/TN株，并已于2019年01月11日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No.17163。