[发明专利]一种丛生福禄考ISSR-PCR分子标记辅助育种方法有效
申请号: | 201910357193.9 | 申请日: | 2019-04-30 |
公开(公告)号: | CN110066884B | 公开(公告)日: | 2023-10-20 |
发明(设计)人: | 熊燕;张兴;曲彦婷;唐焕伟;韩辉;陈菲;李黎 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省科学院自然与生态研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人: | 李宏伟 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明涉及一种丛生福禄考ISSR‑PCR分子标记辅助育种的方法。包括以下步骤1)提取丛生福禄考基因组DNA;2)ISSR‑PCR扩增。本发明建立的丛生福禄考ISSR‑PCR反应体系,条带稳定性高,清晰度高,弥补了国内外对丛生福禄考遗传多样性研究的不足,发明的成果可用于丛生福禄考遗传关系、分子标记辅助育种、新品种选育等方面,具有很大的科学价值与应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 丛生 福禄考 issr pcr 分子 标记 辅助 育种 方法 | ||
【主权项】:
1.一种丛生福禄考ISSR‑PCR分子标记辅助育种的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)提取丛生福禄考基因组DNA;2)ISSR‑PCR扩增;步骤2)ISSR‑PCR扩增反应体系:在25μL反应体系中,包括10×Buffer(Mg2+free)2.5μL,dNTPs 0.15mmol/L,引物800pmol/L,DNA模板40ng,Taq酶1.5U,Mgcl2为3mmol/L;所述的引物选自SEQ ID NO.1‑11中的任一条,如下表所示:步骤2)ISSR‑PCR扩增的条件为:95℃预变性8min,30个循环,每个循环包括,94℃变性30s,48‑55℃退火1min,72℃延伸2min,结束循环后72℃延伸10min。
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