[发明专利]切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法有效
| 申请号： | 201910379859.0 | 申请日： | 2019-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN110055255B | 公开（公告）日： | 2021-02-19 |
| 发明（设计）人： | 刘先凯;王东澍;王晓景;冯尔玲;朱力;潘超;王恒樑 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/90;C12N1/21;C12R1/07 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 魏少伟 |
| 地址： | 100071 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法。本发明提供的切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法采用CRISPR/Cas9系统进行，CRISPR/Cas9系统中包含名称分别为sgRNA1和sgRNA2的两个sgRNA，sgRNA1识别的靶序列为pXO1质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列；sgRNA2识别的靶序列为pXO2质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列。本发明成功得到了不含有pXO1和pXO2质粒的炭疽芽胞杆菌，构建方法简单，切除效率高，且一次能筛选到三种不同质粒丢失表型的菌株，为构建新的疫苗株提供了更快捷、更方便新的手段，为炭疽芽胞杆菌的防治提供了新的思路。 | ||
| 搜索关键词： | 切除 炭疽 杆菌 pxo1 pxo2 质粒 方法 | ||
【主权项】：
1.切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法，其特征在于：所述方法采用CRISPR/Cas9系统切除出发炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒，所述CRISPR/Cas9系统中包含名称分别为sgRNA1和sgRNA2的两个sgRNA，所述sgRNA1识别的靶序列为pXO1质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列；所述sgRNA2识别的靶序列为pXO2质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列。
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