[发明专利]提取及纯化桦褐孔菌多酚的方法

摘要

本发明提供一种高效提取及纯化桦褐孔菌多酚的方法，属于生物提纯技术领域。其方法包括如下步骤：(1)原料预处理；(2)原料浸泡；(3)装柱；(4)循环柱层析提取；(5)大孔树脂的预处理；(6)大孔树脂柱层析吸附及平液用于下一根提取柱提取；(7)大孔树脂柱蒸馏水洗除杂；(8)洗脱；(9)静置除杂；(10)减压浓缩；(11)干燥。本发明采用循环柱层析提取桦褐孔菌多酚，使多层析柱组合成一条连续自动的生产线，可以不间断收取提取液进入下一道大孔树脂分离工序，利于大规模连续生产，且使桦褐孔菌多酚提取率达到85％，解决了现有技术中提取率低，纯度不高的问题。

主权项

1.高效提取及纯化桦褐孔菌多酚的方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤1.原料预处理选取桦褐孔菌，清水冲洗表面杂质后，干燥至含水量为2％～5％，机械剪切粉碎；步骤2.原料浸泡将预处理的桦褐孔菌原料中加入提取溶剂，于70℃下浸泡至材料充分吸胀；步骤3.装柱将充分吸胀的桦褐孔菌原料与提取溶剂一起转入层析柱中，室温下，用柱层析洗脱的方法将多酚从层析柱内的桦褐孔菌中洗脱出来；步骤4.循环柱层析提取将层析柱内流出的洗脱液以1个柱体积为单位进行收集，第1根柱的提取液经大孔树脂柱吸附后流出的平液直接用于第2根提取柱的提取，依次类推，实现多个层析柱循环提取；步骤5.大孔树脂的预处理先将大孔树脂依次用95％酒精、0.1mol/L盐酸、0.1mol/L NaOH溶液分别浸泡12小时后，再装入层析柱，并使层析柱中树脂的高度为柱直径的10～15倍，用蒸馏水洗涤；步骤6.大孔树脂柱层析吸附及平液用于下一根提取柱提取将步骤4的提取液加入经步骤5预处理的大孔树脂柱，或将步骤4的提取液加入再生后的大孔树脂柱，加样时柱内的流出液以柱体积为单位分开收集，多酚被吸附后，大孔树脂柱流出液直接用于下一根提取柱中桦褐孔菌多酚的提取；步骤7.大孔树脂柱蒸馏水洗除杂待样品完全流入柱内后，用蒸馏水洗涤大孔树脂柱，洗去杂质，不损失多酚；步骤8.洗脱用80％的乙醇从大孔树脂柱中洗脱多酚，收集洗脱液；步骤9.静置除杂将步骤8收集好的多酚洗脱液密封，避光在低温冷藏箱中放置12小时后减压过滤或离心过滤除去沉淀；步骤10.减压浓缩将步骤9除杂得到的多酚滤液或离心上清液于40～45℃下减压浓缩至除去乙醇；步骤11.干燥将步骤10减压浓缩后的多酚浓缩液于‑20℃预冷2小时后，再经‑80℃真空冷冻干燥12小时得黄色粉末，即为桦褐孔菌多酚。