[发明专利]一种快速大量制备HbA1c单克隆抗体的方法在审
申请号: | 201910387588.3 | 申请日: | 2019-05-10 |
公开(公告)号: | CN110054689A | 公开(公告)日: | 2019-07-26 |
发明(设计)人: | 高健;徐娅佳;谌敦华;陈旭华;汪渊 | 申请(专利权)人: | 上海钹乐诗生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/44 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 杨军 |
地址: | 201105 上海市闵行区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速大量制备HbA1c单克隆抗体的方法。该方法在连续灌服7天含160μg/ml黑灵芝多糖的1640溶液基础上,进行抗原HbA1c两次脾内注射免疫;同时其在最终免疫3日后采集脾脏利用淋巴细胞分离液分离出脾淋巴细胞,并与骨髓瘤细胞SP2/0‑Ag14进行细胞融合,融合16小时后补充5×HAT溶液。本发明将传统免疫方法与两次脾内注射免疫相结合,同时联合口腔灌服7天黑灵芝多糖以提高阳性B淋巴细胞数量,有效缩短了单克隆抗体制备时间及抗原用量,采用杂交瘤融合16小时后补充5×HAT溶液,提高了融合率、阳性克隆率及HbA1c单克隆抗体获得效率。 | ||
搜索关键词: | 单克隆抗体 制备 注射免疫 融合 淋巴细胞分离液 骨髓瘤细胞 脾淋巴细胞 抗原用量 灵芝多糖 细胞融合 阳性克隆 黑灵芝 杂交瘤 脾脏 补充 抗原 口腔 采集 联合 | ||
【主权项】:
1.一种快速大量制备HbA1c单克隆抗体的方法,其特征在于,其在连续灌服7天含160μg/ml黑灵芝多糖的1640溶液基础上,进行抗原HbA1c两次脾内注射免疫;同时其在最终免疫3日后采集脾脏利用淋巴细胞分离液分离出脾淋巴细胞,并与骨髓瘤细胞SP2/0‑Ag14进行细胞融合,融合16小时后补充5×HAT溶液。
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