[发明专利]一种高产蛋白质小球藻的培养方法

摘要

本发明公开了一种高产蛋白质小球藻的培养方法，将小球藻Chlorella sorokiniana接种到发酵罐中培养，基础培养基和补料培养基均以铵盐为氮源；基础培养基中碳氮比为10:1‑40:1，补料培养基中碳氮比是基础培养基的10‑20倍；培养过程中实时监测培养体系的pH值，根据监测结果用补加氨水的方式调节pH值保持在6.5±0.2并作为氮源补充；实时监测培养体系的葡萄糖浓度，当基础培养基中葡萄糖浓度降至3‑4 g/L时开始流加补料培养基，且流加速度使培养体系中葡萄糖的浓度控制在5 g/L±40%，发酵结束后转入BG11培养基进行光自养，进一步提高蛋白质含量。本发明用氨水调控pH并同时作为氮源补充，有效避免现有固定碳氮比流加培养模式下氮源过量或匮乏对细胞生长的抑制作用，实现快速高效生产高含蛋白质小球藻。

主权项

1.一种高产蛋白质小球藻的培养方法，其特征在于，所述方法包括：第一阶段的培养：将索罗金小球藻Chlorella sorokiniana接种到发酵罐中培养，培养过程中使用的基础培养基和补料培养基均以铵盐为氮源，以葡萄糖为碳源，且基础培养基中葡萄糖的初始浓度为20‑30g/L；基础培养基中碳氮质量比为10:1‑40:1，而补料培养基中碳氮质量比为基础培养基中碳氮比的10‑20倍；在培养过程中，保持发酵温度为28‑30℃、溶氧为35‑45%、pH值在6.5±0.2；培养过程中，实时监测培养体系的pH值，用补加氨水的方式调节培养体系的pH值在6.5±0.2并同时作为氮源补充；在培养过程中，当基础培养基中葡萄糖浓度首次降至3‑4 g/L时开始流加补料培养基并实时监测发酵罐内葡萄糖的浓度，根据葡萄糖浓度的变化实时调节流加补料培养基的速度，使流加速度满足整个培养周期内培养体系中葡萄糖的浓度控制在5 g/L±40%；第二阶段的培养：在上述培养过程中实时监测索罗金小球藻的干重和蛋白质含量，当检测到索罗金小球藻的干重≥200g/L时，将发酵培养获得的小球藻经稀释后转BG11培养基进行光自养培养一段时间，当索罗金小球藻内蛋白质含量达到40%以上时，收获索罗金小球藻。