[发明专利]一种好氧反硝化菌剂的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种好氧反硝化菌剂的制备方法，属于反硝化菌应用技术领域。该技术方法将反硝化菌固定在以海藻酸钠SA和羧甲基纤维素钠CMC为载体，CaCl₂为交联剂，在4℃下交联一定时间后形成的小球中，小球用蒸馏水洗净、风干得到好氧反硝化菌剂；制作过程依次包括：反硝化菌的活化，反硝化细菌扩大培养和固定化小球的制备，并测定了菌剂的反硝化活力。本发明制作所需的材料原料廉价易得可降解，制作工艺及设备要求简单。本发明获得的好氧反硝化菌剂在有氧气存在条件下反硝化效果仍然明显，为现有污水处理工艺中好氧硝化和厌氧反硝化分池进行、需要混合液回流等问题的解决，降低污水处理过程中的基建和运行费用，提供了较好的应用前景。

主权项

1.一种好氧反硝化菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1反硝化细菌的活化：将反硝化细菌菌种置于恒温摇床中于28‑35℃、150‑180r/min的条件下培养20‑28h，然后向培养后的反硝化细菌菌种中加入灭过菌的甘油，制作含甘油体积浓度为25‑35％反硝化菌储存液，将细菌储存液装入甘油管，置于冰箱中冷藏，备用；S2反硝化细菌的扩大培养：将步骤S1中反硝化细菌甘油管中的细菌储存液接种到灭过菌的LB液体培养基中，而后置于恒温摇床中于28‑35℃、150‑180r/min的条件下扩大培养20‑28h；获得扩大培养的反硝化细菌菌液；S3固定化小球的制备：将步骤S2中获得的扩大培养的反硝化细菌菌液置于离心机中于转速3000‑5000r/min的条件下，离心5‑15min，离心结束后弃去上清液，用生理盐水清洗多次并重新悬浮于生理盐水中，制备细菌使用液；将制得的细菌使用液加入包埋剂中，搅拌混合均匀，然后将混合液逐滴加入CaCl₂溶液交联剂中，在0‑10℃下交联12‑36h，再用蒸馏水洗净、干燥，得到小球状的好氧反硝化菌剂；其中，包埋剂为含质量分数1‑4％海藻酸钠和质量分数1‑4％的羧甲基纤维素混合液，通过将海藻酸钠和羧甲基纤维素加入水中，煮沸溶解、混合均匀、冷却后获得。