[发明专利]一种利用土著PAHs降解菌群落去除农田土壤中USEPA PAHs的方法

摘要

本发明公开的是一种利用土著PAHs降解菌群落去除农田土壤中USEPAPAHs的方法。将土壤中土著细菌以PAHs为唯一碳源进行驯化、富集，监测培养液中多环芳烃双加氧酶α亚基(RHDα)基因丰度和细菌群落变化，挑选出合适的细菌群落并扩大培养，然后接种于土壤，即可降低土壤中PAHs含量。所述土著PAHs降解菌群落有较高含量RHDα基因；本发明能够通过提高农田土壤中包括nidA和nahAc在内的RHDα基因丰度，有效去除污染农田中USEPA PAHS，具有高效、环保的优点。

主权项

1.一种利用土著PAHs降解菌群落去除农田土壤中USEPA PAHs的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、土著PAHs降解菌群落的制备：(1)将土壤悬浊液加入预先配制的含有PAHs的土壤浸出液中，对土壤中的细菌以PAHs为唯一碳源进行驯化；(2)监测驯化过程中参与PAHs降解的细菌RHDα基因的丰度以及细菌群落的变化，驯化过程中nidA和nahAc的含量满足要求的做为一级种子液；所述nidA引物的正向引物序列和反向引物序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2所示，SEQ ID No.1：TTCCCGAGTACGAGGGATACSEQ ID No.2：TCACGTTGATGAACGACAAA；所述nahAc引物的正向引物序列及反向引物序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示，SEQ ID No.3：ACTTGGTTCCGGAGTTGATGSEQ ID No.4：CAGGTCAGCATGCTGTTGTT；所述土著PAHs降解菌群落的组成为：无色菌属(Achromobacter)、类诺卡氏菌属(Nocardioides)、甲基菌属(Methylobacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、假黄色单胞菌属(Pseudoxanthomonas)、根瘤菌属(Rhizobium)、嗜甲基菌属(Methylophilus)和志贺氏杆菌(Shinella)；(3)将所述一级种子液经扩大培养得到二级种子液；步骤二、土壤接种：将上述二级种子液接种于土壤，通过提高土壤中nidA和nahAc基因含量即可降低土壤PAHs含量。