[发明专利]一种AFF细胞的构建方法在审
| 申请号： | 201910439090.7 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN110093316A | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 焦顺昌;张嵘;周子珊;陈小彬;张天赋;王海燕;陈红利 | 申请（专利权）人： | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/0784 |
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| 地址： | 102200 北京市昌平区双*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种AFF细胞的构建方法。所述AFF细胞的构建方法，包括以下主要步骤：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；2)使用外周血制备永生化DC，并负载所述突变多肽，与PBMC共孵育，获得AFF细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 细胞 外显子测序 突变多肽 外周血 抗原表位预测 生物技术领域 突变位点 肿瘤组织 共孵育 永生化 制备 抽取 合成 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种AFF细胞的构建方法，其特征在于，包括由以下步骤：(1)对外周血进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；抗原表位预测的方法为：以突变的氨基酸位点为中心，向两侧延伸8个氨基酸，将这段17个氨基酸的多肽作为潜在抗原表位；分析潜在抗原表位的IC50，将IC50＜1000nM的潜在抗原表位确定为抗原表位；(2)将外周血中的树突状细胞，采用TAX‑GFP慢病毒进行感染，并选取理想的克隆作为永生DC，用突变多肽对上述永生DC进行负载，并与PBMC共孵育，获得AFF细胞。
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