[发明专利]低温VSW3 RNA聚合酶体外转录合成全长无中断cas9 mRNA的应用在审
| 申请号： | 201910440379.0 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN111979225A | 公开（公告）日： | 2020-11-24 |
| 发明（设计）人： | 朱斌;夏恒;蒋怡心 | 申请（专利权）人： | 武汉核圣生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/55 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 徐瑛 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开低温VSW3 RNA聚合酶体外转录合成全长无中断cas9 mRNA的应用，所述VSW3 RNA聚合酶体外转录合成全长无中断cas9 mRNA的过程包括以下步骤：(1)构建含VSW3 RNA聚合酶特异性启动子的cas9质粒；(2)PCR法制备转录模板；(3)VSW3 RNA聚合酶转录合成加帽cas9 mRNA；(4)模板DNA消除和mRNA加尾；运用VSW3 RNA聚合酶在低温下转录合成cas9 mRNA不仅能够提高RNA产物的稳定性，更重要的是该酶转录合成cas9 mRNA无中断RNA产物，提高了全长RNA的纯度，省掉分离除去中断RNA产物纯化步骤，减少纯化过程造成的损失，在保证RNA纯度的前提下提高cas9 mRNA产量，是满足cas9 mRNA大量合成需求，且能保证质量和降低生产成本的最佳选择。 | ||
| 搜索关键词： | 低温 vsw3 rna 聚合 体外 转录 合成 全长 中断 cas9 mrna 应用 | ||
【主权项】：
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