[发明专利]脐带间充质干细胞MSCs及其培养方法和应用有效
申请号: | 201910445831.2 | 申请日: | 2019-05-27 |
公开(公告)号: | CN110157666B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 黄建文 | 申请(专利权)人: | 佛山市精准吉因健康管理咨询有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/51;A61K9/08;A61P9/10;A61K31/195;A61K31/198;A61K31/727 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 许英伟 |
地址: | 528500 广东省佛山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种脐带间充质干细胞MSCs及其培养方法和应用,属于生物医药技术领域。该培养方法包括MSCs培养步骤:原代培养:取脐带的华通胶组织,以无血清培养基在低氧条件下培养;传代培养:收集上述P1原代细胞,制得单细胞悬液,离心获得细胞沉淀;向该细胞沉淀中加入无血清培养基,在低氧条件下培养至传代,连续培养到P2‑P3代;每次传代培养时加入盐酸川芎嗪和参麦注射液,待细胞长至预定融合度时,消化、至P6代收集细胞;表型检测:对上述收集得到的细胞进行表型检测,待用。采用该方法培养得到的MSCs制剂,降低了干细胞容易聚集成团特性,从而避免静脉输注进入人体后出现细胞粘附、缗钱状红细胞,细胞团栓塞的情况,使MSCs干细胞技术更好地应用于临床。 | ||
搜索关键词: | 脐带 间充质 干细胞 mscs 及其 培养 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种脐带间充质干细胞MSCs的培养方法,其特征在于,包括MSCs培养步骤,所述MSCs培养包括以下步骤:原代培养:取脐带的华通胶组织,以无血清培养基在低氧条件下培养,直至达到传代标准;传代培养:收集上述P1原代细胞,去除残留培养基,制得单细胞悬液,离心获得细胞沉淀;向该细胞沉淀中加入无血清培养基,在低氧条件下培养至传代,连续培养到P2‑P3代;随后每次传代培养时加入盐酸川芎嗪和参麦注射液,待细胞长至预定融合度时,消化、收集细胞;表型检测:对上述收集得到的细胞进行表型检测,符合CD31、HLA-DR、CD34和CD45阴性,CD44、CD73、CD90和CD105阳性的细胞为目标MSCs细胞,待用。
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