[发明专利]一种提高无细胞体液中微量核酸捕获率的方法在审
| 申请号： | 201910451855.9 | 申请日： | 2019-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN110106169A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 黄彦钦;宋永茂;袁瑛;郑树 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 赵杭丽 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种提高无细胞体液中微量核酸捕获率的方法，通过蛋白裂解，过柱结合，清洗和洗脱等步骤实现。本发明方法可使用常规的蛋白裂解配方和常规的核酸过柱结合纯化方法，只需加入关键的离心去液步骤，无需使用大体积结合液，无需使用磁珠，操作简单，不需要额外的技巧，试剂成本低，与一般组织细胞核酸提取试剂盒相比，可将核酸捕获率提高至3‑8倍。核酸提取所得与专用血浆血清游离核酸提取试剂盒相似，是一种经济又有效的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 无细胞体液 微量核酸 捕获率 常规的 裂解 蛋白 核酸提取试剂盒 提取试剂盒 核酸捕获 核酸提取 试剂成本 游离核酸 组织细胞 结合液 血清 磁珠 核酸 去液 洗脱 血浆 配方 清洗 | ||
【主权项】：
1.一种提高无细胞体液中微量核酸捕获率的方法，包括蛋白裂解，过柱结合，清洗和洗脱等步骤，其特征在于，在蛋白裂解和过柱结合之间加入以下步骤：(1)向盛有已裂解蛋白体液的离心管中加入0.5‑3倍体积的低介电常数溶剂，混匀；(2)在常温下中高速离心；(3)用直接倾倒液体，或者吸除液体，或者倾倒后再加以离心再吸除的方法去除液体成份；(4)用核酸过柱结合液复溶贴壁核酸。
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