[发明专利]一种基因多态性的检测方法在审
| 申请号： | 201910465660.X | 申请日： | 2019-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN110106240A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 赵方圆;雒琴;智慧芳;倪君君 | 申请（专利权）人： | 北京和合医学诊断技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 济南信达专利事务所有限公司 37100 | 代理人： | 李世喆 |
| 地址： | 101111 北京市北京经济技术开发区经*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种基因多态性的检测方法，包括：预先合成CYP2D6基因的c.100C>T位点、c.1661G>C位点和c.4180G>C位点的特异性扩增引物和单碱基延伸引物；从待测样本中提取出待测样本基因组DNA，并作为DNA模板；配置包含特异性扩增引物和DNA模板的聚合酶链式反应PCR扩增体系；利用PCR仪对PCR扩增体系进行扩增；顺次进行消化处理；顺次将配置包含单碱基延伸引物的单碱基延伸反应体系加入反应体系中进行延伸反应，顺次进行脱盐纯化处理，获得纯化产物；利用包括有质谱仪的检测仪器检测纯化产物，确定待测样本的CYP2D6*10的基因多态性。本方案能够提高CYP2D6*10基因多态性的检测效率。 | ||
| 搜索关键词： | 基因多态性 待测样本 位点 单碱基延伸引物 特异性扩增引物 检测 纯化产物 单碱基延伸反应 聚合酶链式反应 基因组DNA 脱盐纯化 消化处理 延伸反应 仪器检测 多态性 质谱仪 扩增 配置 合成 | ||
【主权项】：
1.一种基因多态性的检测方法，其特征在于，包括：预先合成CYP2D6基因的c.100C>T位点、c.1661G>C位点和c.4180G>C位点的特异性扩增引物和单碱基延伸引物，其中，所述C.100C>T位点的特异性扩增引物中的正向引物如SEQ ID NO.1所示，反向引物如SEQ ID NO.2所示；所述C.1661G>C位点的特异性扩增引物中的正向引物如SEQ ID NO.3所示，反向引物如SEQ ID NO4所示；所述C.4180G>C位点的特异性扩增引物中的正向引物如SEQ ID NO.5所示，反向引物如SEQ ID NO.6所示；所述C.100C>T位点的单碱基延伸引物如SEQ ID NO.7所示，所述C.1661G>C位点的单碱基延伸引物如SEQ ID NO.8所示和所述C.4180G>C位点的单碱基延伸引物如SEQ ID NO.9所示；从待测样本中提取出待测样本基因组DNA，并将所述待测样本基因组DNA作为DNA模板；配置包含所述特异性扩增引物和所述DNA模板的聚合酶链式反应PCR扩增体系；利用PCR仪对所述PCR扩增体系进行扩增反应，获得第一反应体系；对所述第一反应体系进行消化处理，获得第二反应体系；配置包含所述单碱基延伸引物的单碱基延伸反应体系；向所述第二反应体系中加入所述单碱基延伸反应体系，并对加入所述单碱基延伸反应体系的所述第二反应体系进行延伸反应，获得第三反应体系；对所述第三反应体系进行脱盐纯化处理，获得纯化产物；利用包括有质谱仪的检测仪器检测所述纯化产物，确定所述待测样本的CYP2D6*10的基因多态性。
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