[发明专利]一种基于芦荟提取物的体外培养自愈合细胞的方法在审
| 申请号： | 201910466460.6 | 申请日： | 2019-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN110257325A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 李智 | 申请（专利权）人： | 苏州智享众创孵化管理有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/079;C12N5/0797 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 姚炜炜 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种基于芦荟提取物的体外培养自愈合细胞的方法，包括以下步骤：将芦荟植株经清洗灭菌后，研磨成浆，过滤取上清液，高速离心取沉淀，真空干燥，得到芦荟提取粉末；将去离子水加热后加入DMEM粉末，搅拌至完全溶解，加入碳酸氢钠和L‑谷氨酰胺，搅拌均匀，然后加入新生牛血清和芦荟提取粉末，搅拌均匀，调节体系的pH值至中性，灭菌，得到DMEM细胞培养液；将DMEM细胞培养液预热后，加入生长因子，混合均匀，接种细胞，恒温震荡培养，得到第一代细胞溶液；将第一细胞溶液稀释后，分别接种于新的DMEM细胞培养液中，置于低氧浓度和高氧浓度的二氧化碳摇床中恒温振荡培养，得到第二代和第三代细胞溶液，即得到具有自愈合性能的细胞溶液。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞溶液 自愈合 芦荟 芦荟提取物 体外培养 灭菌 新生牛血清 细胞 高速离心 谷氨酰胺 恒温震荡 恒温振荡 接种细胞 取上清液 去离子水 生长因子 碳酸氢钠 完全溶解 研磨 植株 第三代 预热 二氧化碳 成浆 低氧 高氧 稀释 摇床 加热 沉淀 过滤 接种 清洗 | ||
【主权项】：
1.一种基于芦荟提取物的体外培养自愈合细胞的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)将芦荟植株经清洗灭菌后，研磨成浆，过滤取上清液，高速离心取沉淀，真空干燥，得到芦荟提取粉末；(2)将去离子水加热后加入DMEM粉末，搅拌至完全溶解，加入碳酸氢钠和L‑谷氨酰胺，搅拌均匀，然后加入新生牛血清和步骤(1)制备的芦荟提取粉末，搅拌均匀，调节体系的pH值至中性，灭菌，得到DMEM细胞培养液；(3)将步骤(2)制备的DMEM细胞培养液预热后，加入生长因子，混合均匀，接种细胞，恒温震荡培养，得到第一代细胞溶液；(4)将步骤(3)制备的第一细胞溶液稀释后，接种于步骤(2)制备的新的DMEM细胞培养液中，置于低氧浓度的二氧化碳摇床中恒温振荡培养，得到第二代细胞溶液；(5)将步骤(2)制备的新的DMEM细胞培养液预热后，加入细胞生长因子，混合均匀，接种稀释后的第二代细胞溶液，置于高氧浓度的二氧化碳摇床中恒温振荡培养，得到具有自愈合性能的细胞溶液。
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