[发明专利]一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的制备方法

摘要

一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的制备方法，所述适配体电化学传感器采用三电极系统，其工作电极的制备方法包括下述步骤：电极预处理，4‑羧基苯基重氮盐的修饰，羧基活化，适配体共价修饰等。然后将制备好的适配体电化学传感器利用差分脉冲伏安法制作标准曲线，最后根据土霉素标准曲线实现对样品中土霉素的测定。本发明可以实现土霉素的高灵敏高选择性检测，适配体通过共价结合的方式固定，有效提高传感器的性能，可以实现样品中土霉素的快速检测，具有很好的应用前景。

主权项

1.一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）GCE的预处理：用粒径为0.05 μm氧化铝粉末抛光，用超纯水冲洗抛光的玻碳电极3~5次，清洗后，通过循环伏安法在0.1 mol/L KCl和5 mmol/L [Fe(CN)₆]^3‑/4‑的混合溶液中测试电极的性能，扫描速度为100 mV/s，扫描范围为‑0.2~0.6 V；如果循环伏安法中两个峰值之间的差值小于120 mV，则证明电极可以继续使用；（2）4‑CP/GCE的制备：将400 μL的0.1 mol/L NaNO₂溶液加入到20 mL含有2 mmol/L 4‑氨基苯甲酸和0.5 mmol/L HCl的溶液中成为混合液；将混合液充分震荡并且放置在室温下反应约5分钟，生成4‑CP溶液，然后吸取20 μL4‑CP滴涂在GCE表面，将修饰电极放置于在真空干燥箱中干燥20 min，得到4‑CP/GCE；（3）act/4‑CP/GCE的制备：取0.1 mol/L EDC和0.1 mol/L NHS的混合溶液20 μL，滴定在4‑CP/GCE表面以活化电极表面，得到act/4‑CP/GCE，反应60 min后，用超纯水冲洗电极表面2~3次；（4）apt/act/4‑CP/GCE的制备：将20 μL且2 μmol/L带氨基的土霉素适配体滴涂在电极表面，4℃下孵育12 h后，冲洗电极表面，然后滴加20 μL1 mol/L乙醇胺，1 h后用超纯水冲洗2~3次，滴定20 μL浓度是1% BSA，室温下放置1 h，用超纯水冲洗电极表面，得到apt/act/4‑CP/GCE。