[发明专利]一种RSK4酶活性的快速检测方法及其应用在审
| 申请号： | 201910486214.7 | 申请日： | 2019-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN110172495A | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 石榴;徐燕华 | 申请（专利权）人： | 武汉合研生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种RSK4酶活性的快速检测方法及其应用。检测方法为：(1)取待测样品、空白对照、阳性对照分别与RSK4酶、RSK多肽底物/ATP混合液共孵育进行激酶反应产生ADP；(2)向步骤(1)的三组激酶反应体系中分别添加ADP‑GloTM反应试剂共孵育，终止激酶反应并消耗完剩余ATP；(3)向步骤(2)的三组反应体系中分别添加激酶检测试剂共孵育，使ADP转化成ATP，并读取新合成的ATP的发光值RLU；(4)按酶活＝(RLU(Sample)‑RLU(Blank))/(RLU(Pos.Ctrl)‑RLU(Blank))×100％计算酶活。该方法基于ADP‑GloTM激酶实验，直接测定反应中消耗的ATP来定量反应的进程。该方法在普通实验室条件下操作，避免对操作人员和环境造成辐射伤害；且体系稳定，测定数据准确度高，可应用于RSK4靶点抑制剂的筛选和RSK4靶点抗肿瘤药物的筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 激酶反应 共孵育 快速检测 激酶 酶活性 靶点 酶活 应用 读取 筛选 抗肿瘤药物 实验室条件 消耗 准确度 测定数据 待测样品 多肽底物 反应试剂 检测试剂 空白对照 体系稳定 阳性对照 直接测定 混合液 新合成 抑制剂 发光 辐射 检测 伤害 转化 进程 | ||
【主权项】：
1.一种RSK4酶活性的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取待测样品、空白对照品、阳性对照品分别与RSK4酶试剂、RSK多肽底物/ATP混合液共孵育进行激酶反应产生ADP；(2)向步骤(1)的三组激酶反应体系中分别添加ADP‑GloTM反应试剂共孵育，终止激酶反应并消耗完剩余ATP；(3)向步骤(2)的三组反应体系中分别添加激酶检测试剂共孵育，使ADP转化成ATP，并读取新合成的ATP的发光值RLU；(4)按酶活＝(RLU(Sample)‑RLU(Blank))/(RLU(Pos.Ctrl)‑RLU(Blank))×100％计算RSK4酶的活性；其中RLU(Pos.Ctrl)为空白对照品与RSK4激酶反应的激酶读值，RLU(Blank)为待测样品中未添加RSK4酶时激酶读值。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉合研生物医药科技有限公司，未经武汉合研生物医药科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910486214.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种香水莲花花粉活力的检测方法
- 下一篇：一种测高密度脂蛋白含量的多层膜干片
