[发明专利]一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的光电化学生物传感器及其制备方法

摘要

本发明公开了一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的光电化学生物传感器及其制备方法。所述光电化学生物传感器，包括：ITO电极，依次修饰在电极表面的剥离的WS2、聚多巴胺、SMCC、辅酶A、phos‑tag‑biotin、streptavidin。本发明利用WS2良好的生物兼容性和导电性，以及特异性识别的亲和素和生物素，实现光电信号的猝灭，提高组蛋白乙酰转移酶的检测灵敏度。利用SMCC中的马来酰亚胺对CoA中的巯基的特异结合和识别作用，提高组蛋白乙酰转移酶活性检测的特异性。本发明的检测方法简单，实现了仪器小型化，且易于操作，仅对ITO电极表面进行简单的处理，即可实现对组蛋白乙酰转移酶活性的检测。

主权项

1.一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的光电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将剥离的硫化钨修饰到预处理后的电极表面；(2)将聚多巴胺修饰于步骤(1)处理后的电极表面；(3)将SMCC修饰于步骤(2)处理后的电极表面；(4)在乙酰辅酶A存在的条件下，组蛋白乙酰转移酶催化底物肽发生乙酰化反应，得到含有辅酶A的催化反应液；(5)将含有辅酶A的催化反应液滴加到步骤(3)处理后的电极表面，利用SMCC的马来酰亚胺与辅酶A的巯基之间的特异性结合作用，将催化反应液中的辅酶A修饰到电极表面；(6)利用辅酶A中的磷酸根与phos‑tag‑biotin之间的特异结合作用，将phos‑tag‑biotin修饰到步骤(5)处理后的电极表面；(7)利用phos‑tag‑biotin与streptavidin之间的特异结合作用，将streptavidin修饰到步骤(6)处理后的电极表面，制备得到检测组蛋白乙酰转移酶活性的光电化学生物传感器。