[发明专利]一种上皮间质混合型及PD-L1阳性循环肿瘤细胞的富集检测方法有效
| 申请号： | 201910506524.0 | 申请日： | 2019-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN110389219B | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 崔莹;张开山;于杰 | 申请（专利权）人： | 杭州华得森生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533;G01N33/536;G01N1/40;G01N33/574 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 陈升华 |
| 地址： | 310051 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种上皮间质混合型及PD‑L1阳性循环肿瘤细胞的富集检测方法，包括：生物素标记的上皮间质混合抗体(采用生物素标记的EpCAM抗体和生物素标记的的抗CSV抗体)；上皮间质混合型CTCs的分离富集；采用荧光素标记的上皮间质混合型抗体(采用荧光素标记的抗PanCK抗体、荧光素标记的抗Vimentin抗体、荧光素标记的抗CD45抗体)对不同亚型CTCs的免疫检测；采用PD‑L1一抗与荧光素标记的PD‑L1二抗对捕获的不同亚型CTCs的PD‑L1表型检测。本发明方法不仅可以简捷高效特异地富集检测上皮间质混合型CTCs，而且可以富集检测上皮型与间质型CTCs。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 上皮 间质 混合 pd l1 阳性 循环 肿瘤 细胞 富集 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种上皮间质混合型及PD‑L1阳性循环肿瘤细胞的富集检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)生物素标记的上皮间质混合抗体的微流控免疫捕获载体的制备；所述的生物素标记的上皮间质混合抗体采用生物素标记的EpCAM抗体和生物素标记的的抗CSV抗体；2)上皮间质混合型CTCs的分离富集；3)采用荧光素标记的上皮间质混合型抗体对不同亚型CTCs的免疫检测；所述的荧光素标记的上皮间质混合型抗体采用荧光素标记的抗PanCK抗体、荧光素标记的抗Vimentin抗体、荧光素标记的抗CD45抗体；4)采用PD‑L1一抗与荧光素标记的PD‑L1二抗对步骤3)中捕获的不同亚型CTCs的PD‑L1表型检测。
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