[发明专利]一种用于检测端粒酶活性的电化学传感器及其检测方法

摘要

本发明基于功能化的纳米磁珠和核酸外切酶III辅助的放大策略构建了一种用于检测端粒酶活性的电化学传感器及其检测方法，实现了对肿瘤细胞端粒酶活性的检测。在本发明中，互补的探针可以与延长的端粒酶引物重复序列杂交，杂交产物通过磁珠分离，端粒酶引物重复序列链被核酸外切酶Ⅲ识别和降解，释放的互补探针能够杂交并打开多个亚甲基蓝标记的发夹DNA探针，经过核酸外切酶III的二次降解后，互补探针又可以进入下一个与MB标记的发夹样结构杂交的循环，而MB标记的探针与金电极表面的捕获探针结合，从而产生与端粒酶活性呈正比的峰电流值，本发明的电化学传感器及其检测方法能够在单细胞水平检测端粒酶活性。

主权项

1.一组用于检测端粒酶活性的探针，其特征在于，具体序列如下：端粒酶底物(TS)引物,SEQ ID NO.1：5′‑NH₃‑TTTTTTTTTTAATCCGTCGAGCAGAGTT‑3′；发夹样探针(HP)，SEQ ID NO.2：5′‑MB‑TTTGTACCCTTTTGTGAGTTGGTTAGGGTTAGGG‑3′；捕获探针(DNA S1)，SEQ ID NO.3：5′‑GGTACATT‑SH‑3′；互补探针，SEQ ID NO.4：5′‑CCCTAACCCTAA‑3′。