[发明专利]粗品羊肝素钠中羊和猪基因含量的qPCR检测方法在审
申请号: | 201910509895.4 | 申请日: | 2019-06-13 |
公开(公告)号: | CN112080553A | 公开(公告)日: | 2020-12-15 |
发明(设计)人: | 姚瑶;金永生;李小明;靳彩娟;姚亦明 | 申请(专利权)人: | 苏州融析生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6806 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 黄春松 |
地址: | 215126 江苏省苏州市苏州工业*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种粗品羊肝素钠中羊和猪基因含量的qPCR检测方法,通过处理粗品羊肝素钠样品,分别得到用于测量羊DNA和猪DNA的溶液;其中用于测量猪DNA的溶液采用单独的试剂盒提取对猪DNA进行提取;并针对待测DNA溶液进行PCR扩增设计引物、PCR反应体系及PCR反应程序;最后分别使用羊DNA和猪DNA标准品制作相应的DNA含量标准曲线,利用PCR扩增制备的PCR模板,通过计算得到羊和猪DNA含量。本发明利用了TaqMan探针法进行检测,灵敏度高、特异性好、操作简单。通过肝素酶和硫酸软骨素酶组合酶解粗品羊肝素钠,有效解除了肝素、硫酸软骨素和硫酸皮肤素对PCR反应的抑制;由于羊肝素钠中猪DNA含量少,采用本发明提取方法,解决了微量猪DNA含量检测准确性问题,效果显著。 | ||
搜索关键词: | 粗品羊 肝素钠 基因 含量 qpcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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