[发明专利]一种草鱼补体成分5多克隆抗体的制备方法有效

专利信息
申请号: 201910516427.X 申请日: 2019-06-14
公开(公告)号: CN110218250B 公开(公告)日: 2020-06-16
发明(设计)人: 许宝红;苏建明;兰时乐;刘巧林;肖调义 申请(专利权)人: 湖南农业大学
主分类号: C07K16/18 分类号: C07K16/18;C07K16/06
代理公司: 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 代理人: 何为;袁颖华
地址: 410128 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 一种草鱼补体成分5多克隆抗体的制备方法,是利用草鱼补体成分5引物通过PCR扩增技术合成草鱼补体成分5基因序列,再克隆到pET‑28a‑SUMO表达载体后导入到大肠杆菌(E.coli Rosetta)中表达,纯化,得到pET‑28a‑SUMO‑补体成分5蛋白抗原,将该抗原多次免疫实验级日本大耳白兔,采血,收集抗血清,用pET‑28a‑SUMO‑补体成分5蛋白作抗原亲合纯化,得到浓缩的补体成分5多克隆抗体。通过本方法能得到满足后续实验需求的浓缩草鱼补体成分5多克隆抗体,为后续检测草鱼补体成分5的表达提供重要实验材料。
搜索关键词: 一种 草鱼 补体成分 克隆 抗体 制备 方法
【主权项】:
1.一种草鱼补体成分5多克隆抗体的制备方法,其特征在于,该方法步骤如下:(1)利用SEQ ID NO.1所示的pET‑28a‑SUMO‑C5‑F和SEQ ID NO.2所示的pET‑28a‑SUMO‑C5‑R引物对,构建如SEQ ID NO.3所示的草鱼补体成分5基因片段的重组表达载体,将该重组表达载体导入表达大肠杆菌中表达,纯化后获得草鱼补体成分5抗原;(2)利用该草鱼补体成分5抗原免疫实验级日本大耳白兔,采血,收集抗血清,将抗血清纯化得到浓缩后的草鱼补体成分5多克隆抗体。
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