[发明专利]一种酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法及应用在审
| 申请号： | 201910521583.5 | 申请日： | 2019-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN110241104A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 程桂林;蒋成君 | 申请（专利权）人： | 浙江中医药大学 |
| 主分类号： | C12N9/96 | 分类号： | C12N9/96;C12N9/20;C12P41/00 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 郑海峰 |
| 地址： | 310053 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明属于人工金属酶领域，公开了一种酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，所述方法采用脂肪酶CAL‑B原位还原金属离子，制备了三种杂化催化剂CAL‑B/PdNPs、CAL‑B/CuNPs及CAL‑B/ZnNPs，采用高分辨透射电镜、能谱、XPS等表征方法确定了杂化催化剂组成、含量和形貌特征，得到的金属纳米颗粒均匀地分布在酶上或嵌入在酶的基质中。运用定点突变技术，确定脂肪酶CAL‑B中111位至128位的氨基酸序列为原位还原金属离子的关键氨基酸序列，其中AGLFFSSKDL通过氢键作用形成的稳定空间结构至关重要。本发明所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂广泛应用于手性醇或胺类化合物的消旋化反应，以及醇或胺类化合物的动态动力学拆分。 | ||
| 搜索关键词： | 杂化催化剂 金属纳米颗粒 制备 脂肪酶 胺类化合物 金属离子 原位还原 空间结构 定点突变技术 动态动力学 关键氨基酸 氨基酸序 透射电镜 形貌特征 高分辨 金属酶 手性醇 消旋化 基质 能谱 氢键 嵌入 应用 | ||
【主权项】：
1.一种酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于酶催化金属离子原位还原，得到的金属纳米颗粒均匀地分布在酶上或嵌入在酶的基质中；所述方法包括如下步骤：(1)在溶液中，按一定比例加入酶和金属离子源，在反应温度下搅拌一定的时间；所述的酶为脂肪酶CAL‑B，或具备关键氨基酸序列的生物大分子；(2)离心，移去上层清液，然后用去离子水洗涤三次，再次离心，合并上层清液；(3)最后用去离子水洗涤后，冷冻干燥，得到酶/金属纳米颗粒杂化催化剂。
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