[发明专利]一种缩短NK细胞培养周期的培养方法在审
| 申请号： | 201910542181.3 | 申请日： | 2019-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN110272872A | 公开（公告）日： | 2019-09-24 |
| 发明（设计）人： | 邓蒙蒙;邢永梅;程箫;刘丹;吴疆;王保如 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞达健康产业有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 合肥方舟知识产权代理事务所(普通合伙) 34158 | 代理人： | 刘跃 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥市高新区*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种缩短NK细胞培养周期的培养方法，具体涉及自体或同种异体外周血单个核细胞在体外稳定的、大量扩增高纯度、高细胞毒活性的NK细胞的方法，步骤为：(1)分离单个核细胞；(2)通过免疫分选去除单个核细胞中的CD3+T淋巴细胞；(3)加入NK细胞培养用无血清细胞培养基及扩增组合物IL‑2和生长素，体外培养2‑5天后全换液；(4)NK细胞换液；(5)收获NK细胞。生长素同IL‑2共同刺激NK细胞扩增培养，可以缩短NK细胞的培养周期，间接降低培养成本，且本培养方法不会降低NK细胞的活性、数量和纯度，解决了传统技术方法中的缺陷，同时在较短时间内满足临床对NK细胞的需求。 | ||
| 搜索关键词： | 培养周期 生长素 单个核细胞 换液 外周血单个核细胞 无血清细胞培养基 扩增组合物 细胞毒活性 扩增培养 免疫分选 体外培养 同种异体 去除 体外 自体 增高 刺激 收获 | ||
【主权项】：
1.一种缩短NK细胞培养周期的培养方法，包括以下步骤：(1)分离单个核细胞；(2)免疫去除CD3+T淋巴细胞，去除CD3+T淋巴细胞后的单个核细胞的接种浓度为0.1‑2×106cells/ml；(3)加入无血清培养基、扩增组合物；(4)培养第2‑5天全换液；(5)NK细胞收获；其特征在于：步骤3中加入的扩增组合物为：IL‑2和生长素。
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