[发明专利]一种质粒载体及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201910546814.8 | 申请日： | 2019-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN110205339A | 公开（公告）日： | 2019-09-06 |
| 发明（设计）人： | 罗开珺;何浩娟;肖炜;寇田超;尤姗;陈昶旭;刘甜 | 申请（专利权）人： | 云南大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/66 |
| 代理公司： | 北京市盈科律师事务所 11344 | 代理人： | 罗东 |
| 地址： | 650091*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种质粒载体及其构建方法与应用，属于生物技术领域。本发明质粒载体为A3EGFP‑ATPaseβ gRNA质粒载体，包括gRNA scaffold元件BUg53TB、3×P3启动子和标记基因表达盒，其中gRNA scaffold元件BUg53TB的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，包含gRNA的核苷酸序列和片段BUg53TB元件均位于3×P3启动子前。本发明gRNA质粒载体A3EGFP‑ATPaseβ gRNA上携带有可视化的增强型绿色荧光蛋白，采用脂质体转染的方法，将此gRNA质粒载体A3EGFP‑ATPaseβ gRNA在High Five细胞中表达，可极其方便地观察gRNA质粒载体在细胞内的转染情况，也可以此来对其后代进行荧光追踪，降低鉴定时的工作量。 | ||
| 搜索关键词： | 质粒载体 核苷酸序列 启动子 构建 种质 增强型绿色荧光蛋白 标记基因表达盒 生物技术领域 细胞 脂质体转染 可视化 荧光 转染 工作量 应用 后代 追踪 携带 观察 | ||
【主权项】：
1.一种质粒载体，其特征在于：质粒载体为A3EGFP‑ATPaseβ gRNA质粒载体，包括gRNA scaffold元件BUg53TB、3×P3启动子和标记基因表达盒，其中gRNA scaffold元件BUg53TB的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，包含gRNA的核苷酸序列和片段BUg53TB元件均位于3×P3启动子前。
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