[发明专利]一种快速构建RNA 3’端基因表达文库的方法在审
| 申请号： | 201910552575.7 | 申请日： | 2019-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN110257479A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 耿亮;辛文 | 申请（专利权）人： | 北京全式金生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人： | 赵晓丹 |
| 地址： | 100192 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开一种快速构建RNA 3’端基因表达文库的方法，包括：使用带有第一接头的Oligo(dT)反转录引物对mRNA样本进行反转录，得到带有第一接头的第一链cDNA；以第一链cDNA为模板合成第二链cDNA，获得带有第一接头的双链cDNA；使用带有第二接头的转座酶复合物处理双链cDNA，在片段化的同时插入第二接头，得到带有第一接头和/或第二接头的双链cDNA片段；其中，所述第一接头与第二接头的序列不完全相同。本发明提供的该方法可有效实现针对真核生物mRNA 3’端的转录组文库构建。 | ||
| 搜索关键词： | 基因表达文库 第一链cDNA 快速构建 双链cDNA 双链cDNA片段 真核生物mRNA 反转录引物 复合物处理 模板合成 文库构建 有效实现 反转录 链cDNA 片段化 转录组 转座酶 样本 | ||
【主权项】：
1.一种快速构建RNA 3’端基因表达文库的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：使用带有第一接头的Oligo dT反转录引物对mRNA样本进行反转录，得到带有第一接头的第一链cDNA；以第一链cDNA为模板合成第二链cDNA，获得带有第一接头的双链cDNA；使用携带第二接头的转座酶复合物处理双链cDNA，在片段化的同时插入第二接头，得到带有第一接头和/或第二接头的双链cDNA片段；其中，所述第一接头与第二接头的序列不相同。
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