[发明专利]一种组织工程用前列腺细胞微囊及其制备方法

摘要

本发明属医学生物工程领域，涉及一种组织工程用前列腺细胞微囊及其制备方法。本发明采用海藻酸钠‑树枝状稳定剂组分‑聚乙二醇的结构，其内层由海藻酸钠对细胞进行包裹，然后用树枝状聚乙烯亚胺和树枝状聚赖氨酸作为稳定剂，其与普通的聚赖氨酸相比，网络结构复杂，交联点较多，提高了微囊的机械性能。微囊的最外层是由单边固定在树枝状稳定剂组分的聚乙二醇链段组成，由于其具有滑动性能，对蛋白质、细胞的粘附起到抑制作用。由于聚乙二醇在人体中是趋于“隐形”的材料，故而本发明所述微囊在一定程度上可以抑制被纤维化，从而延长活性细胞的存活时间。该细胞微囊能够帮助前列腺癌患者克服多种生理功能障碍，提高生活质量。

主权项

1.一种组织工程用前列腺细胞微囊，其特征在于，该细胞微囊按下列步骤进行：（1）将前列腺细胞置于质量百分比浓度为15‑25g/L的海藻酸钠溶液混合，制成悬浮液，使每毫升悬浮液中含1‑6×10⁶个细胞；（2）利用喷雾装置将步骤（1）获得的悬浮液以150‑1000μm直径的微滴状态分散于一种浓度为80‑120mmol/L的氯化钙或乳酸钙溶液中，两种液体的比例为保证每升混合液含0.5‑1×10⁸个细胞，放置5‑10分钟，待沉淀完全除去上清液，获得前列腺细胞的海藻酸钙沉淀；（3）将步骤（2）获得的沉淀物加入到一种浓度为0.3‑0.7g/L的树枝状稳定剂溶液中，二者的比例保证每升液体含0.5‑1×10⁸个细胞，混合均匀，放置5‑20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得沉淀物；（4）将步骤（3）获得的沉淀物加入到浓度为100‑300g/L的活性聚乙二醇溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.5‑1×10⁸个细胞，混合均匀，放置3‑15分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得沉淀物；（5）将步骤（4）获得的沉淀物加入到一种浓度为45‑75mmol/L的柠檬酸钠溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.5‑1×10⁸个细胞，混合均匀，放置5‑20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得前列腺细胞沉淀物；（6）将步骤（5）获得的沉淀物加入到一种浓度为9g/L的氯化钠溶液中清洗，最后将沉淀物转移入细胞培养液中培养待用。