[发明专利]多亚基蛋白质例如抗体在转化的微生物例如巴斯德毕赤酵母中的高纯度产生在审
申请号: | 201910566412.4 | 申请日: | 2012-05-08 |
公开(公告)号: | CN110408644A | 公开(公告)日: | 2019-11-05 |
发明(设计)人: | P·D·麦克尼尔;N·詹森;G·L·莱斯尼基;P·齐;J·A·莱瑟姆;L·F·加西亚-马丁内斯 | 申请(专利权)人: | 奥尔德生物控股有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C07K16/22;C12P21/08;C12R1/84 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 郑天松 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明公开了用于在转化的细胞中产生异源多亚基蛋白质的方法。具体地,本公开提供了以更高的产率和减少的非所需副产物产量产生多亚基蛋白质的改进方法,所述多亚基蛋白质包括可能会或可能不会被分泌出的抗体和其它多亚基蛋白质。在示例性实施方案中,转化的细胞为酵母,例如甲醇营养型酵母如巴斯德毕赤酵母。 | ||
搜索关键词: | 亚基蛋白质 巴斯德毕赤酵母 抗体 转化 甲醇营养型酵母 细胞 副产物 高纯度 产率 异源 分泌 酵母 微生物 改进 | ||
【主权项】:
1.一种产生全长抗体的方法,其包括:(a)提供包含含有提供所述全长抗体的表达的基因的巴斯德毕赤酵母细胞的生长培养物,和使所述毕赤酵母在所述生长培养物中生长约12‑16小时的生长期;(b)在所述生长期后将乙醇添加至所述培养物,其中乙醇至巴斯德毕赤酵母培养物的添加是单次大剂量添加,所述大剂量导致所述培养物中的乙醇浓度在0.5%与1.5%w/v之间;和(c)培养所述培养物以产生分泌的所述全长抗体,其中所述培养包括将含有可发酵碳源的进料添加至所述培养物,其中所述方法相对于在所述大剂量乙醇不存在的情况下进行的所述相同方法降低具有异常化学计量的抗体复合物的相对丰度。
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