[发明专利]一种植物乳杆菌菌剂及其高密度发酵制备方法以及应用在审

专利信息
申请号: 201910573991.5 申请日: 2019-06-28
公开(公告)号: CN110305811A 公开(公告)日: 2019-10-08
发明(设计)人: 王连民;高应瑞;刘珂飞;孟铁健 申请(专利权)人: 天津生机集团股份有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A23K10/18;A23K50/75;C12R1/25
代理公司: 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 代理人: 李绩
地址: 300384 天津市*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明公开了一种植物乳杆菌菌剂及其高密度发酵制备方法,属于生物技术领域,其工艺流程包括植物乳杆菌的高密度发酵培养以及菌剂的冷冻干燥工艺。本发明的植物乳杆菌高密度发酵培养中,在发酵过程中进行蔗糖补料,所述蔗糖补料方式为:当发酵培养至7‑8h,以5‑6mL/L·h的速率开始补料;当发酵培养至11‑15h后,以10‑18mL/L·h速率补料,继续发酵至17‑18h后,以10‑15mL/min速率补料,继续发酵1‑2h结束;通过向菌体中加入冻干保护剂获得植物乳杆菌菌剂。本发明由于采用分多阶段差异化补料,最终发酵获得的活菌数超过1011cfu/mL,突破了常规发酵所获得的菌株活力水平,活菌数显著提升;同时利用本发明的真空冷冻干燥方法制备的植物乳杆菌冻干菌粉的存活率大于90%,其活菌计数结果大于3.0×1012cfu/g。
搜索关键词: 补料 高密度发酵 植物乳杆菌 菌剂 发酵 制备 发酵培养 活菌数 乳杆菌 种植物 蔗糖 冷冻干燥工艺 生物技术领域 真空冷冻干燥 冻干保护剂 冻干菌粉 发酵过程 活力水平 计数结果 存活率 工艺流程 差异化 多阶段 活菌 菌体 菌株 应用
【主权项】:
1.一种植物乳杆菌菌剂的高密度发酵制备方法,其特征在于:步骤如下:将植物乳杆菌经种子培养后,按照接种量3‑5%接入发酵培养基,震荡培养,发酵过程中进行蔗糖补料,所述补料的蔗糖浓度为800‑1000g/L,所述蔗糖补料方式为:当发酵培养至7‑8h,蔗糖残留量为0.04‑0.06%时,以5‑6mL/L·h的速率开始补料;当发酵培养至11‑15h后,蔗糖残留量为0.04‑0.10%时,以10‑18mL/L·h速率补料,继续发酵至17‑19h后,蔗糖残留量为0.10‑0.15%时,以10‑15mL/min速率补料,继续发酵1‑2.5h结束,将所得发酵液经离心获得菌体,向所述菌体中加入冻干保护剂混合,并经冷冻干燥获得植物乳杆菌菌剂。
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