[发明专利]一种稳定表达VP1融合EGFP的单克隆细胞株的制备方法在审
| 申请号： | 201910575181.3 | 申请日： | 2019-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN110305900A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 高凤山 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 胡景波 |
| 地址： | 116622 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种稳定表达VP1融合EGFP的单克隆细胞株的制备方法，属于疫苗技术领域。本发明解决技术问题的技术方案包括以下步骤：培养细胞PK15、G418的适用浓度应为500μg/mL、将LipofectamineTM2000与pEGFP‑N1‑VP1质粒以1:1的比例转染至PK15细胞、G418筛选、弱酸洗脱得到SLA‑I类呈递肽。 | ||
| 搜索关键词： | 单克隆细胞株 稳定表达 制备 培养细胞 弱酸洗脱 疫苗技术 融合 呈递肽 质粒 转染 | ||
【主权项】：
1.一种稳定表达VP1融合EGFP的单克隆细胞株的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：S1.培养细胞PK15；S2.调节G418的浓度；S3.将LipofectamineTM2000与pEGFP‑N1‑VP1质粒转染至PK15细胞；S4.G418筛选；S5.弱酸洗脱得到SLA I类呈递肽。
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