[发明专利]用于检测碱性磷酸酶的、基于连接酶扩增反应催化组装的单量子点纳米传感器及应用在审

专利信息
申请号: 201910576733.2 申请日: 2019-06-28
公开(公告)号: CN110408680A 公开(公告)日: 2019-11-05
发明(设计)人: 张春阳;马飞;刘萌 申请(专利权)人: 山东师范大学
主分类号: C12Q1/6825 分类号: C12Q1/6825;C12Q1/6818;C12Q1/682;C12Q1/42
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 郑平
地址: 250014 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明涉及用于检测碱性磷酸酶的、基于连接酶扩增反应催化组装的单量子点纳米传感器及应用。首次采用连接反应对碱性磷酸酶的活性信号进行识别和放大:在碱性磷酸酶存在时,催化检测探针的3’‑磷酸末端去磷酸化生成3’‑羟基末端,此后利用热稳定的DNA连接酶触发Cy5探针和生物素探针的循环重复连接,产生多个Cy5‑生物素双标记信号探针;信号探针通过链霉亲和素‑生物素的特异性相互作用在605量子点的表面完成自组装,实现从605量子点到Cy5的高效荧光共振能量转移(FRET),最后利用单分子荧光检测技术进行检测。相反,当不存在碱性磷酸酶时,则检测不到荧光共振能量转移信号。仅需一种热稳定连接酶即可实现超高的检测灵敏度,检测限低至5.63×10‑7单位每毫升。
搜索关键词: 碱性磷酸酶 检测 催化 纳米传感器 单量子点 扩增反应 信号探针 连接酶 量子点 生物素 组装 荧光共振能量转移 特异性相互作用 共振能量转移 热稳定连接酶 单分子荧光 检测灵敏度 链霉亲和素 生物素探针 高效荧光 活性信号 检测技术 检测探针 连接反应 磷酸末端 循环重复 羟基末端 热稳定 双标记 自组装 磷酸 触发 探针 应用 放大
【主权项】:
1.一种用于检测碱性磷酸酶的、基于连接酶扩增反应催化组装的单量子点纳米传感器,其特征在于,包括:检测探针、鉴别探针、Cy5探针、生物素探针和605量子点。
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