[发明专利]一种磷霉素氨丁三醇原料药及其制剂中有关杂质的高效液相色谱分离测定方法及应用

摘要

本发明公开了磷霉素氨丁三醇原料药及制剂中杂质高效液相色谱分离测定方法及应用，用于分离杂质；用氨丙基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以示差检测器检测；以磷酸盐缓冲液和甲醇‑乙腈混为流动相；1、系统适用性溶液制备：取原料药或制剂用水润湿，加热，加流动相溶解并稀释作溶液A；取原料药或制剂用A溶解并稀释为系统适用性溶液；2、供试品溶液制备：取原料药或制剂加流动相溶解并稀释成磷霉素氨丁三醇设定含量作供试品溶液；3、对照溶液制备：取供试品溶液用流动相稀释至含磷霉素氨丁三醇相当于供试品溶液质量浓度0.3～0.5％的溶液为对照溶液；4、测定法：取上述三种溶液分别注入液相色谱仪，用主成分自身对照法计算原料药中各杂质含量。

主权项

1.一种磷霉素氨丁三醇原料药及其制剂中有关杂质的高效液相色谱分离测定方法，用于分离分子式为的杂质A、分子式为的杂质B、分子式为的杂质C和分子式为的杂质D中的一种或多种；采用氨丙基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其特征在于：以示差检测器检测，温度15～50℃；以20～100mmol/L磷酸盐缓冲液为流动相A，以甲醇‑乙腈为流动相B，按流动相A与流动相B的体积比为(95:5)～(50:50)的比例混合为流动相，流动相流速为0.8～1.2mL/min；色谱柱温度为20～40℃；进样量1‑500μl；具体包括如下步骤：(1)、按以下配比进行溶液配制：1)、系统适用性溶液制备：取磷霉素氨丁三醇原料药或其制剂0.3g，用水10～300μl使润湿，置40～80℃加热12～36小时，加流动相溶解并稀释至10～50ml，摇匀，作为溶液A；另取磷霉素氨丁三醇原料药或其制剂0.3g，用溶液A溶解并稀释至2.5～10ml，作为系统适用性溶液；2)、供试品溶液制备：按临用新制，取磷霉素氨丁三醇原料药或其制剂适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释成每lml中含磷霉素氨丁三醇60～240mg的溶液，作为供试品溶液；3)、对照溶液制备：精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释至含磷霉素氨丁三醇相当于供试品溶液质量比浓度为0.3～0.5％的溶液，作为对照溶液；(2)测定法：精密量取系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液各1～100μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；采用主成分自身对照法计算磷霉素氨丁三醇原料药中的杂质A、杂质B、杂质C、杂质D四个有关物质及其他可能的已知或未知杂质的含量。