[发明专利]小鼠Tmem240重组真核表达质粒、慢病毒及构建方法有效
申请号: | 201910595216.X | 申请日: | 2019-07-03 |
公开(公告)号: | CN110305905B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 王菁华;穆莉莉;李呼伦;王广友;胡琼琼;张刘磊;赵崴;孔庆飞;孙博;刘玉梅;刘希君;张瑶;张彤帅;张晓雨 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨医科大学 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/66;C12N15/62;C12N7/01;C12R1/93 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 李振瑞 |
地址: | 黑龙江省哈尔*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及小鼠Tmem240重组真核表达质粒、慢病毒及构建方法。本发明重组真核表达质粒是将SEQ ID NO.1序列插入pEGFP‑N1载体的XhoI位点和EcoRI位点之间获得。慢病毒构建是以pEGFP‑T240‑N1质粒为模板,利用引物引物对1进行PCR扩增,合成含有APEX2的目的片段;对载体pLVX‑EGFP‑N1进行双酶切;对Tmem240片段进行双酶切;对含有APEX2目的片段进行双酶切;对酶切产物Tmem240片段,含有APEX2目的片段及载体pLVX‑EGFP‑N1回收、T4连接酶连接、感受态细胞转化,并进行菌落PCR验证;质粒提取,并测序,得到构建成功的pLVX‑T240‑APEX2‑EGFP,将其与psPAX2、pMD2.G质粒共同转染至293Ta细胞,并收集获得。 | ||
搜索关键词: | 小鼠 tmem240 重组 表达 质粒 病毒 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.小鼠Tmem240重组真核表达质粒,其特征在于,所述重组真核表达质粒是将如SEQ ID NO.1所示的序列插入pEGFP‑N1载体的XhoI位点和EcoRI位点之间获得的。
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