[发明专利]一种磁珠法微生物基因组DNA的提取试剂盒及提取方法在审
申请号: | 201910609512.0 | 申请日: | 2019-07-08 |
公开(公告)号: | CN110283816A | 公开(公告)日: | 2019-09-27 |
发明(设计)人: | 黄学文;赵琪;安仙园;沈兰凤;胡仁静 | 申请(专利权)人: | 无锡市第二人民医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 苏州国诚专利代理有限公司 32293 | 代理人: | 韩凤 |
地址: | 214002 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种磁珠法微生物基因组DNA的提取试剂盒及提取方法,包括微生物保存缓冲液、溶菌液Ⅰ、蛋白酶K、硅胶磁珠、异丙醇、乙醇水溶液,还包括溶菌剂Ⅱ、裂解吸附液和加强洗涤液,溶菌剂Ⅱ包括MES、EDTA、Triton X‑100、溶壁酶以及溶壁酶增强剂,裂解吸附液包括Tris‑HCl、氯化钠、EDTA、TrionX‑100以及核酸分离吸收促进剂;加强洗涤液包括Tris‑HCl、氯化锂和乙醇。采用本发明的试剂盒能够彻底破坏革兰氏阳性细菌和各种真菌的细胞壁,形成原生质体,在裂解吸附液的作用下迅速释放原生质体细胞DNA,并高效地吸附在硅胶磁珠上,经洗涤液洗涤并用洗脱液洗脱后,得到高浓度和纯度的微生物DNA。 | ||
搜索关键词: | 吸附液 洗涤液 裂解 微生物基因组DNA 提取试剂盒 磁珠法 溶壁酶 溶菌剂 磁珠 硅胶 氯化钠 细胞壁 革兰氏阳性细菌 原生质体细胞 微生物保存 吸收促进剂 乙醇水溶液 微生物DNA 核酸分离 原生质体 蛋白酶K 缓冲液 氯化锂 溶菌液 试剂盒 洗脱液 异丙醇 增强剂 乙醇 真菌 吸附 洗脱 洗涤 并用 释放 | ||
【主权项】:
1.一种磁珠法微生物基因组DNA的提取试剂盒,包括微生物保存缓冲液、溶菌液Ⅰ、蛋白酶K、硅胶磁珠、异丙醇、乙醇水溶液,其特征在于:还包括溶菌剂Ⅱ、裂解吸附液和加强洗涤液,所述溶菌剂Ⅱ包括MES、EDTA、Triton X‑100、溶壁酶以及溶壁酶增强剂,所述裂解吸附液包括Tris‑HCl、氯化钠、EDTA、TrionX‑100以及核酸分离吸收促进剂;所述加强洗涤液包括Tris‑HCl、氯化锂和乙醇。
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