[发明专利]一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法

摘要

本发明涉及一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法，包括：制备无顶芽茎段，无顶芽茎段的预培养，制备农杆菌菌液并注射于无顶芽茎段，无顶芽茎段的暗培养，无顶芽茎段腋芽的剥离，腋芽的种植；无顶芽茎段具有不对称“Y”型结构，相对叶背浸润法与茎基注射法，容纳相同浓度的农杆菌菌液的空间更大，而采用注射方式能对接种液的体积进行精确定量。此外，本发明利用了病毒更易侵染植物幼嫩芽叶的特性，特别适合于病毒介导的遗传转化或病毒的接种，且明显促进了病毒介导的基因沉默效果、加快了DNA病毒的侵染速度和效率，适用于扦插易成活、有腋芽的植物，具有较好的应用价值。

主权项

1.一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备无顶芽茎段：将植株顶芽切掉，将茎切成若干个带有一个侧枝或一片复叶的茎段，筛选出其中含腋芽的茎段；(2)无顶芽茎段的预培养：将人工剪取的无顶芽茎段种在培养基质中培养；(3)制备农杆菌菌液并注射于无顶芽茎段：制备含有病毒介导的基因沉默载体的农杆菌菌液和/或含有DNA病毒侵染性克隆的农杆菌菌液，并将其注射于无顶芽茎段；(4)无顶芽茎段的暗培养：置于黑暗条件下培养；(5)无顶芽茎段腋芽的剥离，腋芽的种植；将暗培养结束的茎段继续培养，将表现症状的腋芽从茎段上取下，种于培养基质中培养。