[发明专利]小鼠原代肝细胞的分离方法及其制得的小鼠原代肝细胞与应用在审
| 申请号： | 201910644544.4 | 申请日： | 2019-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN110724661A | 公开（公告）日： | 2020-01-24 |
| 发明（设计）人： | 杨凌宸;王爱兵;屠迪;刘伟;吴映欣 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 11589 北京劲创知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 王志敏 |
| 地址： | 410126 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种小鼠原代肝细胞的分离方法及其制得的小鼠原代肝细胞与应用，涉及原代细胞分离技术领域。小鼠原代肝细胞的分离方法，包括如下步骤：将麻醉小鼠依次进行腹腔暴露、肝周管结扎、原位三步灌流和细胞分离得到小鼠原代肝细胞；原位三步灌流依次包括第一灌流，第二灌流和第三灌流；第一灌流，用第一灌流液去除红细胞，并对血液进行抗凝；第二灌流，用第二灌流液去除抗凝剂，并对肝组织进行初步消化；第三灌流，用第三灌流液进一步消化。该小鼠原代肝细胞的分离方法缓解了现有技术中缺乏一种分离后细胞活性高、贴壁迅速、存活细胞收率高、分离成本低并且分离过程不易污染的小鼠原代肝细胞分离方法的技术问题。 | ||
| 搜索关键词： | 灌流 原代肝细胞 小鼠 灌流液 去除 红细胞 分离技术领域 消化 存活细胞 分离成本 分离过程 腹腔暴露 麻醉小鼠 细胞分离 细胞活性 原代细胞 结扎 肝组织 抗凝剂 抗凝 收率 贴壁 血液 缓解 污染 应用 | ||
【主权项】：
1.一种小鼠原代肝细胞的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：将麻醉小鼠依次进行腹腔暴露、肝周管结扎、原位三步灌流和细胞分离得到小鼠原代肝细胞；/n所述原位三步灌流依次包括第一灌流，第二灌流和第三灌流；/n所述第一灌流，用第一灌流液去除红细胞，并对血液进行抗凝；/n所述第二灌流，用第二灌流液去除抗凝剂，并对肝组织进行初步消化；/n所述第三灌流，用第三灌流液进一步消化。/n
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