[发明专利]一种高纯度根皮苷的制备及其质量检测方法

摘要

本发明涉及一种高纯度根皮苷的制备及其质量检测方法，该方法是将多穗柯的干燥叶片粉末用乙醇回流提取，合并提取液浓缩，混悬液用石油醚萃取后，取水液部分再用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层浓缩，得萃取物；乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析，用甲醇‑二氯甲烷系统梯度洗脱，用薄层色谱检测，收集含有根皮苷的洗脱液合并，减压浓缩，再经凝胶柱层析，用甲醇‑三氯甲烷系统洗脱，收集含有根皮苷的洗脱液，减压浓缩，重结晶，得到根皮苷粗结晶；再用制备高效液相法分离纯化，对所收集的洗脱液利用HPLC检测，得到纯度在90%～98%之间的根皮苷和纯度大于98%的根皮苷组分。本发明工艺简单分离速度快，生产周期短，所得产品纯度高，质量可控，适合工业化生产。

主权项

1.一种高纯度根皮苷的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 ：/n1) 多穗柯的干燥叶片粉末，用乙醇回流提取，提取液滤过，合并滤液，回收乙醇，得浸膏； 2）浸膏再经石油醚萃取，静置，弃去石油醚层，水液部分再用乙酸乙酯萃取，静置，合并乙酸乙酯层，浓缩得乙酸乙酯萃取物 ；/n3）乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析，用甲醇-二氯甲烷系统梯度洗脱，收集含根皮苷的流分，所述的甲醇-二氯甲烷系统梯度洗脱条件为：0～A分钟，洗脱系统为二氯甲烷 ；B～C 分钟，洗脱系统为甲醇-二氯甲烷，甲醇:二氯甲烷的比例为1:100～1:10 ；所述A 为 5～20，所述 B 为 5～21，所述 C 为 70～110；/n4）流分用 TLC 检测，将含有根皮苷的流份合并，浓缩，即得纯度为70～80％的根皮苷粗提物 ；/n5）将根皮苷粗提物，经凝胶柱层析，用甲醇-三氯甲烷体积比1:1系统洗脱，收集洗脱液，每10ml流份为一份；/n6）流分用 TLC 检测，将含有根皮苷的流份合并，浓缩，重结晶，即得纯度为80～90％的根皮苷粗结晶 ；/n7）将根皮苷粗结晶用制备高效液相色谱法分离纯化，收集根皮苷组分；/n8）对所收集的每一份根皮苷组分利用 HPLC 检测，合并保留时间相同而且纯度在90%-98% 之间和纯度大于 98% 以上的根皮苷，减压浓缩，得到纯度 90%-98% 之间以及大于 98% 以上的根皮苷。/n