[发明专利]一种表达BVDV-E0的重组牛肠道病毒的构建方法与初步应用有效

专利信息
申请号: 201910654523.0 申请日: 2019-07-19
公开(公告)号: CN110452889B 公开(公告)日: 2021-07-27
发明(设计)人: 侯绍华;任肖;贾红;张姗;姜一曈 申请(专利权)人: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
主分类号: C12N7/01 分类号: C12N7/01;C12N15/66;C12R1/93
代理公司: 北京德崇智捷知识产权代理有限公司 11467 代理人: 董柏雷
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种表达BVDV‑E0的重组牛肠道病毒的构建方法及其初步应用,所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后,将BVDV的E0序列插入到BEV全长cDNA中,获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒。所述rBEV‑E0重组病毒的初步应用,将分离纯化后的重组病毒免疫6~8周龄的SPF级别的Balb/c雌鼠,在不同时间点收集其血清样本进行检测,小鼠不但可以稳定表达E0蛋白,并能对其产生有效的免疫应答。本发明的重组病毒可同时用于BEV和BVDV的防控,也为其他外源基因提供了合适的的rBEV插入位点,为后续外源基因的插入、重组病毒的制备等研究提供有效的技术平台。
搜索关键词: 一种 表达 bvdv e0 重组 肠道病毒 构建 方法 初步 应用
【主权项】:
1.一种表达牛病毒性腹泻病毒E0基因(BVDV-E0)的BEV重组病毒,包括牛肠道病毒,所述牛肠道病毒的感染性克隆毒株是BEV BJ101株的克隆毒株,具有SEQ ID NO.1所示的全基因序列,其特征在于:所述感染性克隆毒株是通过反向遗传操作的方法获得BEV BJ101毒株的全长cDNA克隆并获得拯救毒株rBEV后,将优化后的牛病毒性腹泻病毒E0序列插入到BEV全长cDNA中,获得可稳定表达外源基因E0的重组牛肠道病毒,所述E0序列具有如SEQ ID NO.2所示。/n
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