[发明专利]霍山石斛组培苗培育及炼苗方法

摘要

本发明涉及一种农业种植技术。一种霍山石斛组培苗培育及炼苗方法，包括：1）无菌种子混合液制备与原球茎诱导，用无菌滴管吸适量种子混合液，逐一滴入诱导培养基中，培养18‑22天，获得小圆形颗粒状原球茎；2）将原球茎分散转接至增殖培养基中，培养18‑30天，获得大量原球茎；3）将增殖培养获得的原球茎，转接在分化培养基中，培养35‑40天，让其分化形成根、茎、叶俱全的幼苗；4）把幼苗转接到壮苗与生根培养基中，培养80‑90天，获得大量的健壮组培苗；5）当霍山石斛组培苗长出4～6片真叶，苗高5～7cm，单株根数3条以上，且根系完好，即可进行炼苗。本发明培育的组培苗长势健壮，移栽成活率高，性状优良稳定，对促进霍山石斛规模化和产业化种植，具有重要的技术指导作用。

主权项

1.一种霍山石斛组培苗培育及炼苗方法，其特征在于：主要包括如下步骤：1）无菌种子混合液制备与原球茎诱导（1）对霍山石斛稍泛黄、未开裂的饱满成熟果实进行常规消毒处理；（2）将处理后的霍山石斛果实用无菌刀切开，把种子抖入适量的无菌水中摇匀，制成无菌种子混合液；（3）配制诱导培养基：1/2M S+6‑BA 0.6m g/L+NAA0.4m g/L+土豆汁20g/ L +蔗糖30g/ L +琼脂7g/ L ，PH为5.8；（4）用无菌滴管吸适量种子混合液，逐一滴入诱导培养基中，培养18～22d，获得小圆形颗粒状原球茎；2）增殖培养（1）制备增殖培养基：M S+2，4‑D 0.2m g/L+NAA0.4m g/L+土豆汁20g/ L +蔗糖30g/ L +琼脂7g/ L，PH为5.8；（2）将原球茎分散转接至增殖培养基中，培养26‑30天，获得大量原球茎；3）分化培养（1）制备分化培养基：M S+IBA 0.8m g/L+NAA0.3m g/L+香蕉泥100g/ L +蔗糖30g/ L +琼脂7g/ L，PH为5.8；（2）将增殖培养获得的原球茎，转接在分化培养基中，培养35‑40天，让其分化形成根、茎、叶俱全的幼苗；4）壮苗与生根培养（1）制备壮苗与生根培养基：M S+NAA0.4m g/L+香蕉泥100g/ L +蔗糖30g/ L +琼脂7g/ L，PH为5.8；（2）把幼苗转接到壮苗与生根培养基中，培养80‑90天，获得大量的健壮组培苗；5）当霍山石斛组培苗长出 4 ～6 片真叶，苗高 5 ～7cm，每苗根数 3 根以上，且根系完好，即可进行炼苗。