[发明专利]采用一测多评法测定山苦荬中绿原酸、咖啡酸和木犀草苷含量的方法

摘要

本发明涉及中药成分检测技术领域，具体涉及一种采用一测多评法测定山苦荬中绿原酸、咖啡酸和木犀草苷含量的方法，包括如下步骤：（1）对照品溶液的制备（2）供试品溶液的制备（3）色谱条件与系统适用性试验（4）测定。本发明采用绿原酸为内参物进行一测多评，建立绿原酸与咖啡酸和木犀草苷之间的相对校正因子，通过相对校正因子计算山苦荬中绿原酸、咖啡酸和木犀草苷含量。本发明方法简单、操作方便，实用性高，结果准确，采用该方法能实现山苦荬中绿原酸、咖啡酸和木犀草苷成分含量的同步测定，从而有效评价和控制山苦荬药材的质量，为保证临床用药安全和有效，及其药材资源的开发提供科学依据。

主权项

1.采用一测多评法测定山苦荬中绿原酸、咖啡酸和木犀草苷含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）对照品溶液的制备：精密称量绿原酸对照品11.59mg，咖啡酸对照品6.72mg、木犀草苷对照品13.60mg，分别加入25mL容量瓶中，加适量甲醇稀释至刻度，超声使其溶解，摇匀，精密量取上述绿原酸溶液1.5mL、咖啡酸溶液1.5mL和木犀草苷溶液6.0mL，置同一10mL容量瓶中并用甲醇定容至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液，混合对照品溶液每1mL溶液中含绿原酸66.9μg，咖啡酸40.35μg，木犀草苷306.78μg；（2）供试品溶液的制备：取山苦荬药材粉末2g，置于100mL锥形瓶中，加入体积浓度为70%的甲醇30mL，称定重量，超声提取60min，温度30℃，频率70kHz，放冷，用体积浓度为70%的甲醇补足减失的重量，过滤，取续滤液过微孔滤膜0.45µm，即得；（3）色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：CAPCELLPAK TYPE MGⅡSIZE ‑C₁₈；体积流量为1.0ml·min^‑1；检测波长为330nm；柱温为25℃；进样量为5µL； 流动相采用甲醇‑0.2%磷酸水溶液进行梯度洗脱，洗脱程序见表1，理论塔板数按绿原酸峰计算不低于5000；（4）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5µL,注入液相色谱仪，在上述系统适应性的色谱条件下测定，采用内标法计算，供试品溶液的特征图谱中呈现绿原酸、咖啡酸和木犀草苷的峰值，以绿原酸为内参物，计算绿原酸与咖啡酸和木犀草苷的相对校正因子，通过相对校正因子计算山苦荬中绿原酸、咖啡酸和木犀草苷含量。